T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞（DC）、巨噬细胞等免疫细胞的体外活化、扩增与功能极化，是免疫学基础研究、疫苗开发及细胞治疗的核心环节。然而，您在实验过程中是否遇到过以下困扰：
- T细胞体外活化后增殖缓慢、分化方向不纯，Th1/Th2/Th17/Treg亚型诱导效率低下？
- NK细胞扩增倍数不足、细胞毒性弱，难以满足功能实验需求？
- DC细胞诱导分化不成熟、抗原呈递能力差，影响后续T细胞激活实验？
小美今天继续为大家带来美仑生物MGC™系列高活性细胞因子，专为各类免疫细胞的体外激活、扩增及亚型极化而优化，帮助您从源头掌控细胞质量，让每一次免疫实验都稳健可靠。
一、为什么免疫细胞活化与培养离不开优质细胞因子？
免疫细胞的命运——从静止到活化、从扩增到分化、从效应到记忆，每一步都受到细胞因子的精密调控。T细胞的激活依赖TCR信号与共刺激信号的协同，而IL-2则是维持其增殖的核心驱动力；NK细胞的扩增与细胞毒性功能离不开IL-2、IL-15、IL-12、IL-18等因子的协同作用；DC细胞的分化与成熟则需要GM-CSF、IL-4、TNF-α等因子的时序性诱导。
使用高活性、低内毒素、无载体蛋白的细胞因子，能显著提升免疫细胞培养的成功率和实验结果的批间可重复性。美仑MGC™系列细胞因子专为免疫细胞培养场景设计，助您从源头把控实验品质。
图 1. 免疫细胞类型
二、免疫细胞培养方案推荐
以下分别介绍T细胞、NK细胞和DC细胞的活化、扩增及分化常用细胞因子组合，供参考。
1.T细胞活化、扩增与分化核心方案
| T细胞亚群 | 核心诱导因子 | 可选小分子/强化因子 | 主要功能 |
| T细胞活化（通用） | 抗CD3抗体(2μg/mL) + 抗CD28抗体(2μg/mL) + IL-2 (20ng/mL) | —— | T细胞受体交联，诱导活化与增殖 |
| Th1 | IL-12 (10~20ng/mL) + IL-2 (20ng/mL) | IFN-γ (10ng/mL，可选) | 抵御细胞内病原体 |
| Th2 | IL-4 (10~20ng/mL) + IL-2 (20ng/mL) | STAT6激动剂(1μM，可选) | 防御过敏/哮喘 |
| Th9 | TGF-β (2~5ng/mL) + IL-4 (10ng/mL) + IL-2 (20ng/mL) | RAR抑制剂 LE135 (1μM) | 抗肿瘤 |
| Treg | TGF-β (5~10ng/mL) + IL-2 (20~50ng/mL) | 视黄酸(10nM) + 西罗莫司(10nM) | 免疫调节 |
| Th17 | TGF-β (2ng/mL) + IL-6 (20~50ng/mL) | IL-23 (10ng/mL，维持)；IL-1β (10ng/mL，可选) | 抵御胞外细菌/参与自身免疫炎症 |
| TFH | IL-6 (20ng/mL) + IL-21 (20ng/mL) | ICOS激动剂 + STAT3激动剂 | 辅助B细胞 |
| NKT | IL-15 (100ng/mL) + IL-7 (10ng/mL) | GM-CSF (20ng/mL，可选)、α-GalCer (100ng/mL) + Notch激动剂 | 抗病毒/抗肿瘤 |
图2. Naïve T细胞分化为不同T细胞亚群相关的细胞因子
2.自然杀伤（NK）细胞激活、扩增与分化核心方案
| 分类 | 发育阶段 | 核心细胞因子 | 小分子/添加剂 | 说明 |
| 分化 | HSC→CLP | SCF、Flt3L、IL-3、IL-7 | 维生素C、L-谷氨酰胺 | 造血干细胞向共同淋巴祖细胞分化 |
| CLP→NKP | SCF、Flt3L、IL-15 | Notch抑制剂（如DAPT，可选） | 向NK祖细胞定向 | |
| NKP→iNK | IL-15 | —— | 未成熟NK细胞扩增 | |
| iNK→mNK | IL-15 | —— | 成熟NK细胞维持 | |
| 功能性调控 | 细胞毒性 | 组合1：IL-2或IL-15 + IL-12 + IL-18；组合2：IL-15 + IL-21 | RAR激动剂（可选） | 抗病毒、抗肿瘤 |
| 调节性 | TGF-β、IL-15（低剂量） | —— | 免疫调节、抑制炎症 | |
| 耐受性 | TGF-β / IL-10 | —— | 诱导NK细胞功能抑制 | |
| ADCC活化 | IL-2 + 抗CD16抗体 | 交联CD16受体，模拟ADCC |
图3. 自然杀伤细胞分化与培养相关的细胞因子
3. 树突状细胞（DC）分化与成熟核心方案
| 途径 | 阶段/细胞类型 | 核心细胞因子 | 小分子/补充剂 | 说明 |
| 淋巴途径 | HSC → Lymphoid precursor | SCF、Flt3L、IL-7 | 维生素C、L-谷氨酰胺 | 造血干细胞向淋巴祖细胞分化 |
| Lymphoid precursor → pDC前体 | Flt3L、IL-3（可选） | —— | 淋巴祖细胞向浆细胞样DC前体分化 | |
| pDC前体 → 未成熟pDC | Flt3L | —— | 维持pDC前体扩增 | |
| 未成熟pDC → 成熟pDC | —— | CpG ODN、R848（TLR7/8激动剂） | 激活pDC，分泌大量I型干扰素（IFN-α/β），抗原呈递 | |
| 髓系途径 (经典DC) | HSC → Myeloid precursor | SCF、Flt3L、GM-CSF（可选） | —— | 造血干细胞向髓系祖细胞分化 |
| Myeloid precursor → CDP → pre-cDC | Flt3L、GM-CSF | —— | 常见DC前体（共同DC祖细胞） | |
| pre-cDC → cDC1/cDC2 | Flt3L、GM-CSF | Notch抑制剂（可选，促进cDC1） | cDC1（CD141+）：交叉呈递；cDC2（CD1c+）：CD4+ T活化 | |
| 髓系途径 (单核来源DC) | Myeloid precursor → 单核细胞 | M-CSF | —— | 产生外周血CD14+单核细胞 |
| 单核细胞 → 未成熟DC（iDC） | GM-CSF、IL-4、IL-13（可选） | —— | 高吞噬能力，低表达MHC-II和共刺激分子 | |
| iDC → 成熟DC（mDC） | TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ | LPS、Poly(I:C)、PGE2、CD40L | 高表达MHC-II、CD80/CD86/CD83，强抗原呈递能力 |
图4. 树突状细胞分化与发育相关的细胞因子
三、T细胞体外分化状态调控的应用详解（文献PMID: 23207483）
过继性细胞治疗(ACT)是肿瘤免疫治疗的重要手段，而回输T细胞的分化状态直接影响其体内持久性和抗肿瘤效果——高度分化的效应T细胞虽体外功能强，但体内持久性差；而分化程度较低的T细胞则具有更强的体内扩增能力和抗肿瘤活性。Yang et al. (2012) 在 Cancer Immunology, Immunotherapy上发表的研究，系统比较了不同细胞因子组合对TCR基因工程人CD8+T细胞体外分化状态的影响，发现时序性组合使用IL-12、IL-7和IL-21可诱导具有CD62LhighCD28highCD127highCD27highCCR7high表型的低分化T细胞，并显著增强其在体内的持久性。
1.分化流程概述
该研究采用时序性细胞因子添加策略：所有培养组均在抗CD3抗体（OKT3）刺激下以IL-2（300 IU/mL）启动活化与扩增；第4天起加入不同细胞因子组合（IL-12+IL-7或IL-12+IL-21等）；第7天撤除IL-12，继续培养至第10~12天。通过这一“启动-极化-撤除”的时序方案，可获得低分化表型的CD8+T细胞。
图5. T细胞体外分化状态调控流程图
2.各阶段培养基与细胞因子/小分子组合
| 阶段 | 持续时间 | 基础培养基 | 核心细胞因子/抗体 | 作用简述 |
| 活化与转导阶段 | 第0~4天 | AIM-V + 5%人AB血清 | 包被抗CD3抗体(1μg/mL)+ IL-2(300IU/mL) | TCR交联激活，驱动初始扩增；同时进行慢病毒转导 |
| 极化阶段 | 第4~7天 | IL-12(10ng/mL)+ IL-7(10ng/mL) 或 IL-12(10ng/mL)+ IL-21(10ng/m) | 诱导低分化表型，上调CD62L、CD28、CD127、CD27、CCR7，诱导干细胞相关基因表达 | |
| 扩增与维持阶段 | 第7~12天 | IL-7(10ng/mL)或 IL-21(10ng/mL)单独维持(撤除IL-12) | 维持低分化表型，支持细胞继续扩增 |
【注】
·撤除IL-12是关键步骤：持续IL-12存在会抑制CD127表达，撤除后方可获得CD127high表型；IL-21组在撤除IL-12后，CD8+T细胞的IFN-γ和IL-2分泌虽有下降，但低分化表型更显著(CD62LhighCD28high CD127highCD27highCCR7high)。
·干细胞相关基因（SOX2、NANOG、OCT4、LIN28A）的上调，提示该方案使T细胞获得了更接近“干性”的状态。
四、MGC™细胞因子验证数据（部分举例）
1.高生物活性—ED50
Recombinant Human FLT-3L(Cat. No. MGC024) stimulates proliferation of OCI-AML5 cells.
The ED50 for this effect is ≤1.0 ng/mL. The activity of recombinant Human FLT-3L(Cat. No. MGC024) was higher than the other competing product.
2.高生物活性—T细胞扩增与表型维持
图6. 人外周血T细胞体外培养后表面标志物的比较.
流式检测显示，CD3+T细胞纯度> 90%，其中CD3+CD4+比例与Day0接近，CD3+CD8+比例> 50%，细胞活力> 85%，美仑细胞因子及培养基(PWL098)可高效扩增原代人T细胞，维持良好亚群比例
所用细胞因子：IL-2 (MGC038, 50ng/mL)
所用抗体：抗CD3抗体(MGC011, 2μg/mL)、抗CD28抗体(MGC013, 2μg/mL)
相关产品信息
- 细胞因子和重组蛋白
| 产品编码 | 产品名称 | 表达系统 及标签 | 种属 | 内毒素 (EU/μg) | 包装规格 |
| MGC003 | Recombinant Human Heat Stable bFGF | E.coli | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC006 | Recombinant Human BMP-4 | E.coli | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC024 | Recombinant Human FLT-3L | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC025 | Recombinant Human GM-CSF | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC026 | Recombinant Mouse GM-CSF | CHO | Mouse | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC028 | Recombinant Human G-CSF | HEK293 | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC029 | Recombinant Mouse G-CSF | CHO | Mouse | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC034 | Recombinant Human IFNγ | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC037 | Recombinant Human IL-1B | E.coli | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC038 | Recombinant Human IL-2 | CHO | Human | ≤0.001 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC039 | Recombinant Human IL-3 | E.coli | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC040 | Recombinant Human IL-4 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC041 | Recombinant Human IL-5 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC042 | Recombinant Human IL-6 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC043 | Recombinant Bovine IL-6 | E.coli | Bovine | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC044 | Recombinant Human IL-7 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC045 | Recombinant Human IL-10 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC047 | Recombinant Human IL-12 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC048 | Recombinant Human IL-13 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC049 | Recombinant Human IL-15 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC051 | Recombinant Human IL-18 | E.coli | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC052 | Recombinant Human IL-21 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC054 | Recombinant Human IL-23 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC055 | Recombinant Mouse IL-27(His Tag) | HEK293，C-6His | Mouse | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC065 | Recombinant Human M-CSF | E.coli | Human | ≤0.1 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC066 | Recombinant Mouse M-CSF | CHO | Mouse | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC080 | Recombinant Human SCF | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC081 | Recombinant Human TGF-β1 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC083 | Recombinant Human TGF-β3 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC084 | Recombinant Human TNFα | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC086 | Recombinant Human TPO | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC088 | Recombinant Human VEGF165 | CHO | Human | ≤0.01 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC091 | Recombinant Human 4-1BBL | HEK293 | Human | ≤0.05 | 10μg/50μg/1mg |
| MGC011 | Recombinant Anti-Human CD3 mAb | CHO | Mouse | ≤0.001 | 50μg/1mg |
| MGC012 | Recombinant Anti-Human CD16 mAb | CHO | Mouse | ≤0.001 | 1mg |
| MGC013 | Recombinant Anti-Human CD28 mAb | CHO | Mouse | ≤0.001 | 50μg/1mg |
- 小分子
| 产品编码 | 产品名称 | CAS | 包装规格 |
| MC9833 | Y-27632 | 146986-50-7 | 1mg/5mg/10mg/50mg/100mg |
| MC9828 | SB-431542 | 301836-41-9 | 5mg/10mg/50mg |
| MB5152 | DAPT（GSI-IX） | 208255-80-5 | 10mg |
| MB1302 | 维A酸;全反式维A酸;维生素A酸;视黄酸 | 302-79-4 | 1g/5g |
- 其他
| 产品编码 | 产品名称 | 包装规格 |
| PWL002 | 特级胎牛血清（原代细胞干细胞专用） | 25mL/100mL/500mL |
| PWL098 | T细胞无血清培养基(无异源) | 100mL/1000mL |
| PWL038 | Advanced DMEM/F-12 | 500mL |
| PWL088 | Non-essential Amino Acid (NEAA, 100×) | 100mL |
| PWL031 | L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液（200mM） | 100mL |
| PWL048 | Meiluncell®高回收率干细胞专用清洗液 | 200mL |
| PWL085 | 重组胰蛋白酶消化液（含EDTA，不含酚红），干细胞专用 | 100mL |
| PWL234 | 无蛋白非程序细胞冻存液（干细胞专用） | 20mL/100mL |
| PWL062 | 双抗灭菌液,青霉素/链霉素溶液，灭菌 | 100mL |
| MA0345 | 抗生素-抗真菌（100×）;三抗 | 100mL |
| PWL207 | CellTiter-Meiluncell 3D发光法细胞活力检测试剂盒 | 10mL(>100T)/100mL(>1000T)/500mL(>5000T) |
| MA0440 | 增强型ATP检测试剂盒 | 200T |
| MA0220 | AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 | 10T/50T/100T/50T×5/100T×5 |
| MA0223 | 一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光） | 20T/50T |
| MA0343 | 细胞培养污染检测试剂盒 | 20T |
| MA0329 | Caspase3/7活性检测试剂盒 | 20T/100T |
| MA0219 | 活性氧检测试剂盒(ROS) | 100T/1000T |
| MA0726 | 人白细胞介素2酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0727 | 人白细胞介素4酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0728 | 人白细胞介素6酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0772 | 人白细胞介素7酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0831 | 人白细胞介素15酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA1050 | 人白细胞介素21酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0737 | 人α肿瘤坏死因子酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0887 | 人肿瘤坏死因子β酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0723 | 人γ-干扰素酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA1099 | 人巨噬细胞集落刺激因子酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0722 | 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |
| MA0780 | 小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子酶联免疫吸附测定试剂盒 | 96次/盒 |