Nano-Light萤光素酶报告基因检测试剂盒

产品简介

Nano-Light萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，符合高通量检测的需求。Nano-Light萤光素酶是一个经过基因工程改造的小分子酶(19.1kDa)，是性能卓越的生物发光报告基因。它使用一种新型底物，可产生高强度、辉光型发光。信号强度是萤火虫以及海肾萤光素酶的150倍；超强信号稳定性，半衰期可达2小时。Nano-Light萤光素酶的生物发光反应不依赖ATP，自发光背景低，光信号更亮，同时抑制背景发光以获得最高检测灵敏度。

反应原理如下：

保存条件

全新试剂盒-20℃保存，自生产之日起12个月有效。

运输条件

干冰运输。

注意事项

1．检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。

2．由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。

3．酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。

4．如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以获得最佳的检测结果。

5．Nano-Light萤光素酶具有超强信号稳定性，半衰期可达2小时。但是当酶表达量过高时，信号半衰期会缩短，建议优化实验设计方案（如减少质粒转染量），避免萤光素酶表达量过高。

6．NANOLIGHT Luciferase Substrate (50×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规格，并混匀后即可使用。

7．Nano-Light萤光素酶催化的生物发光的最强波长为 460 nm。

数据展示

图1. Nano-Light萤光素酶光强、稳定性及萤光线性对比P进口品牌。美仑Nano-Light单酶报告基因试剂盒体外Nano-Light酶活检测中，绝对光强和稳定性都已经十分接近P进口品牌，并且Nano-Light萤光线性良好（R²=0.999）。

图2. 细胞培养体系下验证光强稳定性及细胞密度-光强标曲。在细胞培养基环境中，原位检测发光状况，可以看出美仑组的稳定性和绝对光强与P进口品牌差异不大，并且细胞密度-光强标曲线性良好（R²=0.999）。

图3. TNFα梯度诱导293T细胞的NF-κB通路对比P进口品牌。美仑Nano-Light萤光素酶报告基因检测试剂盒得到的结果与P进口品牌一致性保持良好。

图4. Nano-Light酚红耐受及不同培养基中发光验证。配制含有浓度梯度的酚红PBS溶液，每孔加入等量的Nano-Light萤光素酶和发光反应液，验证Nano-Light的发光稳定性。由图可知，meilunbio® Nano-Light对比P进口品牌具有更好的酚红耐受能力。此外，Nano-Light在常见培养基里发光水平波动不大（图中以RPMI 1640归一化处理）。