产品简介:
pCMV-Mito-AT1.03线粒体ATP荧光探针质粒用于在哺乳动物线粒体中表达带有线粒体定位信号(Mitochondrial localization signal, MLS),实现线粒体ATP的荧光标记检测,也可在活细胞或固定细胞中标记线粒体的位置和形态。本质粒以CMV为启动子,表达的AT1.03探针属于ATeam系列,是基于FoF1-ATP合酶ε亚基构建的ATP检测指示剂。AT1.03为低亲和力ATeam探针,37℃条件下Kd值为3.3 mM,可检测毫摩尔级ATP含量。将本质粒转染哺乳动物细胞后,依托自身线粒体定位信号,AT1.03蛋白可特异性富集于线粒体,适用于实时监测线粒体内ATP浓度的动态变化。
本质粒含有卡那霉素抗性基因和Neo抗性基因,转化大肠杆菌后,可使用卡那霉素抗性筛选阳性菌;转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达融合蛋白的细胞株。
质粒主要信息:具体全序列请详询技术支持
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Mito-AT1.03 | 651-692/2703-2726 |
| multiple cloning site | 2749-2797 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1822-1939 |
| SV40 polyA signal | 2809-3192 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 3330-3634 |
| bla promoter | 3659-3783 |
| SV40 promoter | 3803-4141 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 4176-4967 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 4968-5426 |
| pUC origin | 5555-6222 |
使用说明:
- 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳或测序方法进行鉴定。
- 推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
T7 primer (2749-2797): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
保存条件:-20℃保存。
运输条件:湿冰运输。
注意事项:
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
质粒图谱:


