产品简介:
pLenti-U6-gRNA-Cas9-P2A-EGFP-Bla基因编辑质粒用于插入靶向目的基因的sgRNA并使用CRISPR/Cas9基因编辑系统进行基因编辑。本质粒以CMV为启动子,转染细胞后能够在靶细胞中高效表达绿色荧光蛋白GFP标签蛋白,呈现明亮的绿色荧光,便于观察转染效率或感染效果。本质粒在插入靶向目的基因的sgRNA后,可以直接转染细胞进行基因编辑,也可以用于包装慢病毒后感染细胞或组织进行基因编辑。
本质粒含有氨苄青霉素抗性基因和杀稻瘟菌素S (Blasticidin S)抗性基因,转化大肠杆菌后,可使用氨苄青霉素抗性筛选阳性菌;转染细胞后,可以使用杀稻瘟菌素S筛选稳定表达融合蛋白的细胞株。
质粒主要信息:具体全序列请详询技术支持
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-199 |
| 5′ LTR (truncated) | 217-397 |
| HIV-1 Ψ | 444-569 |
| RRE | 1062-1295 |
| cPPT/CTS | 1822-1939 |
| U6 promoter | 1990-2230 |
| filler | 2235-4119 |
| gRNA scaffold | 4120-4195 |
| EF-1α core promoter | 4257-4468 |
| Kozak sequence | 4487-4496 |
| Cas9 | 4493-8596 |
| nucleoplasmin NLS | 8597-8644 |
| FLAG | 8645-8668 |
| P2A | 8678-8734 |
| EGFP | 8735-9454 |
| WPRE | 9470-10058 |
| Factor Xa site | 9941-9952 |
| 3′ LTR (ΔU3) | 10130-10363 |
| bGH poly(A) signal | 10395-10619 |
| f1 ori | 10665-11093 |
| SV40 promoter | 11107-11436 |
| SV40 ori | 11287-11422 |
| EM7 promoter | 11484-11531 |
| BSD | 11550-11948 |
| SV40 poly(A) signal | 12078-12199 |
| M13 rev | 12248-12264 |
| lac operator | 12272-12288 |
| lac promoter | 12296-12326 |
| CAP binding site | 12341-12362 |
| ori | 12650-13238 |
| AmpR | 13409-14269 |
| AmpR promoter | 14270-14374 |
| CMV enhancer | 14640-15019 |
使用说明:
- 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳或测序方法进行鉴定。
- 推荐使用的测序引物序列如下:
hU6-F primer: 5′-GAGGGCCTATTTCCCATGATT-3′
保存条件:-20℃保存。
运输条件:湿冰运输。
注意事项:
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
质粒图谱:


