Meilunbio®高效细胞转染试剂

产品简介

Meilunbio^®高效细胞转染试剂是一款美仑生物全栈自研的新型核酸转染试剂。经30余种细胞测试，其效果达到甚至超过了目前主流转染试剂，完美适配DNA、mRNA及siRNA的高效细胞转染需求，并且血清和抗生素兼容，有利于维持细胞的最佳状态。

本产品使用非常简便，无需对转染试剂进行稀释：可将计算量转染试剂直接加入到核酸稀释液中，孵育10-15分钟即可加样。

本产品适用范围：大多数常规细胞、难转染细胞、原核细胞及干细胞的转染。

本产品为无菌溶液。一般条件下24孔板转染，每次使用约2μL，则1mL规格可做约500次转染。

产品优势

高转染效率：转染效果达到甚至超过了目前主流转染试剂，尤其是mRNA转染效果更佳；
无细胞毒性：不受血清和抗生素影响，无需更换细胞培养液；特别适用于敏感细胞；
操作简便：转染试剂无需稀释，直接向稀释后的核酸中加入孵育即可；
容错率高：兼容市面各转染试剂配置方案，无需担心用错方法；
适用范围广：对大多数常规细胞、难转染细胞均适用，适合多种DNA、mRNA及siRNA等的转染。

数据展示

1. DNA转染效果

方法：分别使用我司MA3000和进口T品牌的相应产品对不同细胞转染pEGFP-N3质粒，48小时后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况，判断转染效果。

结果：在下述30余种细胞中，我司自研产品MA3000在超半数细胞中表现出优于进口对照的转染效果，可实现替代。

图1. 不同细胞转染DNA效果比较

2. mRNA转染效果

方法：分别使用我司MA3000和进口T品牌的相应产品对不同细胞转染EGFP mRNA，48小时后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况，判断转染效果。

结果：在下述20余种细胞中，我司自研产品MA3000在超半数细胞中表现出优于进口对照的转染效果，可实现替代。​​

图2. 不同细胞转染mRNA效果比较

保存条件

-20℃，自生产之日起12个月有效。建议第一次使用时按照每次实验所需量进行分装保存。若短期使用，可保存于2~8℃，5个月有效；若想长期保存，可置于-80℃，24个月有效。

运输条件

湿冰运输。

使用方法

请详见说明书。

注意事项

1. 本产品的推荐用量：①DNA或mRNA：DNA或mRNA/转染试剂=1:4（μg/μL），但转染试剂使用量受细胞类型及其他实验因素影响，建议初次使用时可固定核酸用量（如：96孔板，推荐100ng），在DNA或mRNA/转染试剂=1:0.5~1:7（μg/μL）的范围内，设置转染试剂用量梯度，以筛选出最佳转染用量。②siRNA：在正式实验前，建议通过转染荧光修饰siRNA、流式或荧光显微镜考察细胞siRNA摄取量来确定合适的转染试剂/siRNA比例以及siRNA用量，因为有效的细胞内siRNA摄取是siRNA高效敲低目标蛋白的关键前提。
2. DNA或mRNA的初始储备浓度宜控制在0.5-5μg/μL范围内；siRNA的推荐浓度为15μM，但仍需根据目标靶点的敲减难易程度，在10-50μM范围内进行微调；调整时，转染试剂与siRNA的用量比例尽量保持不变。
3. 细胞生长状态非常影响转染效率！请务必选择传代次数相对较少、且生长状态良好的细胞开展相关实验！
4. 细胞培养基的pH值偏低（颜色偏黄），会显著影响转染效果；如若，此时不好完全换液，可选择半数换液法：即吸走一半上清，补加一半完全培养基。
5. 建议在首次实验时，先于96孔板内摸索、确定最优核酸/转染试剂比例，之后再于大体系中开展实验；
6. 个别细胞（如HeLa、A549、THP-1、CHO-K1、HEK 293T等）比较敏感，会因单位细胞DNA摄入量过高而产生DNA毒性（非转染试剂原因）；此时，可通过提高细胞密度，或降低DNA使用量，或在转染6h后换液等操作，来降低单位细胞DNA摄入量以降低DNA毒性；同时，选择在转染后12-24小时内对细胞进行检测处理。mRNA转染无此问题。若上述方法仍无法改善，建议更换新细胞（前期测试中遇到过3次以上细胞问题导致难转染），或检测细胞是否有支原体等微生物感染并加以清除后再开展实验。
7. 经测试，本产品在室温放置1周后，仍能保持良好转染效果。
8. 本产品为无菌包装，无需过滤，请注意无菌取用。
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表1. 不同细胞培养器皿中DNA或mRNA及转染试剂用量参考表（仅供参考）

附表2. 不同细胞培养器皿中siRNA及转染试剂用量参考表（仅供参考）

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