产品简介
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,用于检测样品中小鼠 PD-L1 的浓度。小鼠 PD-L1 捕获抗体已经预包被于酶标板上,当加入样品或标准品时,其中的小鼠 PD-L1 会与捕获抗体结合,而其它游离成分则会通过洗涤被除去。接着,再加入生物素标记的小鼠 PD-L1 抗体后,抗小鼠 PD-L1 抗体与小鼠 PD-L1 结合,形成夹心的免疫复合物,其它游离成分则通过洗涤被除去。随后加入酶复合物,生物素与酶复合物特异性结合,这样酶复合物上的 HRP 就与夹心的免疫复合物连接起来,而其它游离成分则通过洗涤被除去。最后加入显色剂,若样品中存在小鼠 PD-L1,则会形成免疫复合物,其上连接的 HRP 会催化无色的显色剂氧化生成蓝色物质,而后加入终止液,最终产物呈黄色。通过酶标仪检测,读取 450 nm 处的 OD 值,小鼠PD-L1 浓度与 OD450 值之间呈正比,通过检测标准品绘制标准曲线,对照未知样品中 OD 值,即可计算出样品中小鼠 PD-L1 的浓度。
程序性死亡配体 1(PD-L1,又称 B7-H1 或 CD274)是一种由 CD274 基因编码的 33 kDa I 型跨膜糖蛋白,属于 B7 家族,在静息状态下低水平表达于抗原提呈细胞、血管内皮细胞及多种上皮细胞,在炎症、肿瘤及妊娠免疫耐受中发挥核心作用。PD-L1 通过胞外 IgV 样结构域与受体 PD-1(CD279)或 CD80(B7-1)结合,招募 SHP-1/2 磷酸酶,抑制 TCR 下游 ZAP70、PI3K-Akt 与 Ras-MEK-ERK 信号,从而阻断 T 细胞增殖、细胞因子(IFN-γ、IL-2)分泌及细胞毒功能;同时上调 PTEN 与 BATF,促进耗竭表型并限制糖酵解代谢。PD-L1 可被金属蛋白酶(ADAM10/17)或胞啃作用剪切为可溶性片段(sPD-L1),亦能通过外泌体分泌,实现远程免疫抑制信号的级联放大。
产品参数:
| 检测范围 | 31.25 pg/mL~2,000 pg/mL |
| 敏感性 | 5 pg/mL |
| 特异性 | 系统和其它因子无交叉反应 |
| 样本类型 | 小鼠血清、血浆、体液、组织匀浆或细胞培养上清 |
使用方法: 详见说明书
保存条件:
2~8℃保存,自生产之日起6个月有效;长期储存请置于-20℃,自生产之日起12个月有效。
运输条件:湿冰运输(按季节)
注意事项:
1.浓缩洗涤液低温情况下可能会出现结晶,请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液;
2.严禁混用不同批号试剂盒的组分;
3.加样过程请避免产生气泡,实验操作过程中一定要保证试剂充分混匀,否则会使结果产生较大误差;
4.说明书中提到的室温条件,请严格控制在25~28℃;
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
6.本产品仅限科研使用。

