选购指南 I 类器官培养用细胞因子

类器官作为体外重现组织结构与功能的重要3D模型，其形成、扩增与成熟高度依赖培养体系中细胞因子的精准配比。您在实验过程中是否有以下困扰：

▶ 肠道类器官如何维持干性？

▶ 脑类器官怎样定向分化？

▶ 肝类器官的成熟又依赖哪些信号？

小美今天为大家带来美仑生物全新推出的MGC™系列高活性细胞因子，涵盖肠道、脑、肝、心脏、血管、肿瘤等十余种类器官培养方案，并附上经典因子组合与关键小分子，助您稳定构建理想模型。

一、为什么类器官培养离不开优质细胞因子？

类器官的自我组装、谱系分化和长期维持，本质上是干细胞/祖细胞对微环境信号的响应。其中，Wnt、EGF、FGF、BMP、Noggin、RSPO等家族成员扮演着“指挥家”角色——它们或激活增殖，或抑制分化，或维持干性。使用高活性、低内毒素、无载体蛋白的细胞因子，能显著提升类器官的成功率和重复性。

图1. 类器官构建示意图（PMID: 30534474）

二、主流类器官培养细胞因子组合推荐

以下方案汇总了不同类器官类型所需的核心细胞因子及辅助小分子（部分常用小分子美仑生物亦有提供），供您参考。

正常组织类器官培养方案推荐：

类器官类型	相关细胞因子	相关小分子
肠道	Activin A、BMP-4、EGF、FGF-2、FGF-4、IL-22、LR3 IGF1、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、CHIR-99021、SB-202190
胃	Activin A、BMP-4、EGF、FGF-4、FGF–10、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、CHIR-99021、SB-202190、PMA、PD0325901
脑	BDNF、BMP-4、CNTF、CXCL12、DKK-1、EGF、FGF–2、FGF-4、FGF-8、FGF-19、GDNF、Insulin、Noggin、SHH、TGF-β1	Y-27632、CHIR-99021
心脏	Activin A、BMP-4、FGF–2、FGF-4、FGF-10、LIF	Y-27632、CHIR-99021、LY-294002
肝	Activin A、BMP-2、BMP-4、DKK-1、EGF、FGF-2、FGF-4、FGF-7、FGF-10、 FGF-19、 HGF、Insulin、OSM、RSPO1、TGF-β1、Wnt-3a	A83-01、Y-27632、CHIR-99021
肺	BMP-2、BMP-4、BMP-5、BMP-7、HGF、EGF、FGF-2、FGF-7、FGF-10、FGFR2、HGFAC、IGF-1、Noggin、RSPO1	A83-01、Y-27632、CHIR-99021
血管	BMP-4、EGF、FGF–2、VEGF121、VEGF145、VEGF164、VEGF165、VEGF183、Wnt-3a	Y-27632、CHIR-99021
胰腺	EGF、FGF–10、Noggin、RSPO1、Wnt-3a	A83-01、Y-27632、CHIR-99021
肾脏	BMP-2、BMP-4、FGF-2、FGF-4、FGF-7、FGF-9、HGF	Y-27632、CHIR-99021、Dorsomorphin
乳腺	EGF、FGF-2、FGF-7、FGF-10、Noggin、NRG1-β1、RSPO1、Wnt-3a	A83-01、Y-27632、SB-202190
前列腺	Activin A、EGF、FGF-2、FGF-10、Noggin、RSPO1	A83-01、Y-27632、SB-202190

图2. 正常组织类器官类型与关键因子信息图

肿瘤组织类器官培养方案推荐：

类器官类型	相关细胞因子	相关小分子
结直肠癌	EGF、FGF-2、FGF–10、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、SB-202190
乳腺癌	EGF、FGF–7、FGF–10、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、SB-202190
肝癌	EGF、FGF–10、HGF、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、SB-202190
胰腺癌	Activin A、EGF、FGF-2、FGF-7、FGF–10、Noggin、RSPO1、RSPO3、NRG1-β1	A83-01、Y-27632、CHIR-99021、SB-202190
肺癌	EGF、FGF-2、FGF-4、FGF–7、FGF–10、Noggin、RSPO1	A83-01、Y-27632、CHIR-99021、SB-202190
头颈癌	EGF、FGF-2、FGF-10、Noggin、RSPO1	A83-01、Y-27632、CHIR-99021
胃癌	EGF、FGF–10、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、CHIR-99021、SB-202190
前列腺癌	EGF、FGF-2、FGF-10、Noggin、RSPO1	A83-01、Y-27632、SB-202190
卵巢癌	EGF、FGF-2、FGF-10、HGF、IGF1、Noggin、NRG1-β1、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、SB-202190
肾癌	Activin A、BMP-4、EGF、FGF-2、FGF-9、GDNF、IL-2、Insulin、Noggin、RSPO1	Y-27632、CHIR-99021、SB-202190
胆管癌	EGF、FGF-10、HGF、Insulin、RSPO1	A83-01、Y-27632
膀胱癌	EGF、FGF-2、FGF-7、FGF-10、HGF、IL-2、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、Y-27632、SB-202190
黑色素瘤	EGF、FGF-1、Noggin、RSPO1、Wnt3a	A83-01、SB-202190

图3. 肿瘤组织类器官类型与关键因子信息图

三、胃癌类器官培养方法详解

胃癌类器官是研究胃上皮稳态、胃癌发生机制、肿瘤异质性及药物敏感性的重要模型。以文献（PMID: 29703791）为例，简述关键步骤及细胞因子应用。

图4. 胃癌器官培养方法示意图（PMID: 29703791）

组织采集与运输

▶ 组织来源：手术切除的胃癌组织及配对的正常胃黏膜（距肿瘤边缘≥5cm）；也可使用胃镜活检组织。

▶ 运输介质：含有1% 青霉素-链霉素的Advanced DMEM/F12培养基，4℃保存，24小时内完成处理。

组织消化与细胞分离

▶ 将组织剪成 1~3 mm³ 的小块。

▶ 加入胶原酶II型或胶原酶IV型，于37℃震荡消化30~60min，至形成浑浊细胞悬液。

▶ 加入含10% FBS的培养基终止消化。

▶ 通过70μm细胞筛过滤，去除未消化的组织块。

▶ 300×g离心5min，弃上清。如红细胞较多，加入红细胞裂解液处理 2~3min，再用PBS 洗涤一次。

基质胶包埋

▶ 将细胞沉淀与基质胶按1:1~1:3比例混合（全程冰上操作）。

▶ 使用预冷移液器，将混合液滴入预热的24孔板（每滴15~30μL），避免气泡。

▶ 放入37℃培养箱，静置15~20min使基质胶完全凝固。

▶ 每孔加入300~500μL预热的胃癌类器官完全培养基。

▶ 置于37℃、5% CO₂培养箱，每2~3天更换一次培养基。

胃癌类器官完全培养基配方

▶ 基础培养基：Advanced DMEM/F12

▶ 添加剂：B-27（1×）、N-2（1×）、GlutaMAX（1×）、HEPES（10mM）、青霉素/链霉素（1×）

▶ 核心细胞因子与小分子（参考文献推荐浓度）：

组分	推荐浓度	功能
RSPO1	500ng/mL	激活Wnt通路
Noggin	100ng/mL	抑制BMP信号，促进扩增
EGF	50ng/mL	促进上皮细胞增殖
FGF–10	100ng/mL	促进胃祖细胞扩增
HGF	25ng/mL	促进细胞存活与生长
Wnt3a（可选）	100ng/mL	启动并长期维持类器官（对正常胃必需）
A83-01	0.5 μM	TGF-β 抑制剂，阻止分化，促进扩增
Y-27632	10μM	ROCK抑制剂，防止失巢凋亡，仅首次传代或复苏后添加24h
Nicotinamide	10mM	抑制细胞衰老，提高长期扩增能力

【注】正常胃癌类器官必须添加 Wnt-3a；部分胃癌类器官可能对 Wnt-3a 依赖性降低，但起始培养时仍建议添加 100 ng/mL。

培养与传代

▶ 类器官出现时间：通常在3~7天内形成囊状或实心上皮球体。

▶ 首次传代时机：当每滴中出现10~30个类器官或密度达到孔面积的70~80%（约7~14天）。

▶ 传代比例：1:2~1:4，视生长速度而定。

▶ 传代方法：用TrypLE Express或Accutase将类器官解离成小细胞团（10~50μm），重新包埋至新鲜基质胶中

四、MGC™细胞因子验证数据（部分举例）

高生物活性—ED_₅₀

Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in CHO cells in the presence of 5ng/mL BMP2 (Cat. No. MGC005).The ED₅₀ for this effect is < 30ng/mL.The activity of Recombinant Human Wnt-3a (Cat. No. MGC090) was higher than other competing products.

高生物活性—类器官培养

图5. 胃癌类器官培养效果图

所用细胞因子：EGF (MGC015) + FGF-10 (MGC021) + Noggin (MGC067) + RSPO1(MGC078) + Wnt3a (MGC090)

美仑细胞因子家族 · 始终如一的品质承诺

相关产品信息

细胞因子

产品编码	产品名称	表达系统及标签	种属	内毒素 (EU/μg)	包装规格
MGC001	Recombinant Human Activin A	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC003	Recombinant Human Heat Stable bFGF	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC004	Recombinant Human BDNF	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC005	Recombinant Human BMP-2	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC006	Recombinant Human BMP-4	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC009	Recombinant Human CNTF	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC014	Recombinant Human DKK-1	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg
MGC015	Recombinant Human EGF	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC017	Recombinant Human FGF-4	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC018	Recombinant Human FGF-7/KGF	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC019	Recombinant Human FGF-8b	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC020	Recombinant Human FGF-9	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC021	Recombinant Human FGF-10/KGF2	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC022	Recombinant Human FGF-19	E.coli	Human	≤0.02	10μg/50μg/1mg
MGC031	Recombinant Human GDNF	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC032	Recombinant Human β-NGF	HEK293	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC033	Recombinant Human HGF	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC034	Recombinant Human IFNγ	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC038	Recombinant Human IL-2	CHO	Human	≤0.001	10μg/50μg/1mg
MGC040	Recombinant Human IL-4	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC048	Recombinant Human IL-13	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC053	Recombinant Human IL-22	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg
MGC058	Recombinant Human IGF-1	HEK293	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC060	Recombinant Human LR3 IGF1	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC061	Recombinant Human LIF	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC062	Recombinant Mouse LIF	CHO	Mouse	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC067	Recombinant Human Noggin	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC068	Recombinant Mouse Noggin	CHO	Mouse	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC070	Recombinant Human Neurturin	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC071	Recombinant Human OSM	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC072	Recombinant Human NRG1-β1	E.coli	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC081	Recombinant Human TGF-β1	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC087	Recombinant Human VEGF121	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC088	Recombinant Human VEGF165	CHO	Human	≤0.01	10μg/50μg/1mg
MGC090	Recombinant Human Wnt-3a (hFc Tag）	CHO，C-Fc	Human	≤0.1	10μg/50μg/1mg

小分子

产品编码	产品名称	CAS	包装规格
MC9833	Y-27632	146986-50-7	1mg/5mg/10mg/50mg/100mg
MC2046	SB 202190	152121-30-7	5mg/10mg/25mg/100mg
MC9830	A 83-01	909910-43-6	1mg/5mg/10mg/50mg/100mg
MC9028	MK-2206 dihydrochloride	1032350-13-2	5mg/10mg/50mg/100mg
MC9834	Dorsomorphin dihydrochloride	1219168-18-9	5mg/10mg/20mg/50mg/100mg
MC9828	SB-431542	301836-41-9	5mg/10mg/50mg
MC9582	RepSox	446859-33-2	10mg/50mg
MC9606	LDN193189	1062368-24-4	10mg/50mg
MB1661	烟酰胺/尼克酰胺/维生素B3	98-92-0	25g/100g
MB5152	DAPT (GSI-IX)	208255-80-5	10mg
MB5959	Forskolin(毛喉素;佛司可林)	66575-29-9	10mg
MB1138	Dinoprostone	363-24-6	1mg/10mg
MB5682	CHIR-99021	252917-06-9	5mg
MB1302	维A酸;全反式维A酸;维生素A酸	302-79-4	1g/5g
MB5663	Ipatasertib(GDC0068)	1001264-89-6	2mg/10mg
MB1735	N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)	616-91-1	25g/100g
MB3700	Purmorphamin	483367-10-8	5mg
MB4050	IWR-1-endo	1127442-82-3	10mg
MB0258	IDE1	1160927-48-9	1mg
MB6045	LY294002	154447-36-6	10mg/50mg
MB1089	维生素K3,甲萘醌	58-27-5	10g/100g
MB4054	IWP-2	686770-61-6	10mg/50mg
MB0262	IWP-4	686772-17-8	5mg/25mg

其他

产品编码	产品名称	包装规格
PWL038	Advanced DMEM/F-12	500mL/500mL×20
PWL043	Neural-27添加剂 (50X), 去除维生素 A; 等同于B-27	10mL/100mL
MA0659	Versene溶液	100mL
MA0036	1M HEPES 溶液(细胞培养级)	100mL
PWL079	N-2添加剂 (100X)	5mL/50mL
PWL031	L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液（200mM）	100mL
PWL002	特级胎牛血清(原代细胞干细胞专用)	25mL/100mL/500mL
PWL048	Meiluncell®高回收率干细胞专用清洗液	200mL
PWL234	细胞保存液(无蛋白GMP干细胞专用)	20mL/100mL
PWL084	ITS+液体培养基补充剂（100×）	10mL
PWL062	双抗灭菌液,青霉素/链霉素溶液，灭菌	100mL
MA0015	PBS(1X),细胞培养级	500mL/500mL×10
MA0009	D-PBS,含钙、镁,（细胞培养级）	500mL
MA0155	L-谷氨酰胺溶液((100X),200mM	100mL
MB3235	人转铁蛋白	10mg/100mg
MB2665	胶原酶II型	100mg/1g
MB2711	胶原酶IV型	100mg/1g
MA0207	红细胞裂解液(10X),改良型	100mL
PWL064	DMSO(细胞培养级)	125mL
PWL300	Meiluncellgel 基质胶 (标准型)	5mL/10mL
PWL301	Meiluncellgel 基质胶 (标准型, 无酚红)	5mL/10mL
PWL302	Meiluncellgel 基质胶 (低生长因子)	5mL/10mL
PWL303	Meiluncellgel 基质胶 (低生长因子, 无酚红)	5mL/10mL
PWL304	Meiluncellgel 基质胶 (高浓度)	5mL/10mL
PWL305	Meiluncellgel 基质胶 (高浓度, 无酚红)	5mL/10mL
PWL306	Meiluncellgel 基质胶 (高浓度, 低生长因子)	5mL/10mL
PWL307	Meiluncellgel 基质胶 (干细胞用, 无酚红)	5mL/10mL
PWL308	Meiluncellgel 基质胶 (类器官用, 无酚红)	5mL/10mL
PWL207	CellTiter-Meiluncell 3D发光法细胞活力检测试剂盒	10mL(>100T)/100mL(>1000T)/500mL(>5000T)
MA0655	YO-PRO-1 3D染色液	10mL/50mL/200mL
MA0440	增强型ATP检测试剂盒	200T
MA0220	AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒	10T/50T/100T/50T×5/100T×5
MA0223	一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光）	20T/50T
MA0343	细胞培养污染检测试剂盒	20T