Meiluncell®全能细胞分离液(可替代Percoll)

价格范围:¥700.00 至 ¥5,000.00

英文名:Meiluncell® Density Gradient Media (Percoll Substitute)
质量标准:细胞培养级
- +
SKU: PWL668 分类: , ,

产品简介

Meiluncell®全能细胞分离液 (Meiluncell® Density Gradient Media) 是一款经充分验证的细胞、病毒及亚细胞颗粒密度梯度离心介质,其作用原理、操作方法与Percoll™ Density Gradient Media(货号:17-0891)高度一致,是其优质等效替代产品。

本产品依托成熟的密度梯度离心原理,能够在1.0~1.3 g/mL密度区间内,温和、快速、高效地完成多种细胞类型、病毒及亚细胞组分的分离工作,适配绝大多数沉降系数大于60S的生物颗粒分离场景。

产品核心成分为聚乙烯吡咯烷酮 (PVP) 涂层改性的硅胶颗粒介质,颗粒直径为15~30 nm,游离PVP含量仅1%~2%,配方科学稳定。本产品硅胶颗粒存在天然粒径异质性,离心过程中可实现差异化速率沉降,自发形成连续、等渗的密度梯度。实验操作便捷灵活,可通过梯度混合器或高速离心机快速构建密度梯度;也可将样品与介质提前预混,在原位形成的梯度中完成分离,实现梯度构建与样品分离一步完成,单次操作即可达成分离效果,大幅简化实验流程、提升实验效率。

 

产品用途

适用于血液、组织等生物样本处理,可高效完成细胞、细菌、病毒、细胞器及各类亚细胞组分的分离、纯化与富集,还可有效分离完整活细胞与受损细胞及细胞碎片。

 

产品特点

  • 活性保护优异:低粘度,等渗时无毒,生物相容性高,不穿透生物膜,不粘附细胞,可稳定保留生物颗粒密度与样本活性。
  • 使用便捷高效:离心可自发形成连续密度梯度,支持大体积样本处理,操作简单、耗时短。
  • 适配范围广泛:兼容多种常规缓冲液与培养基,可灵活调配1.0~1.3 g/mL密度梯度。
  • 性能稳定可靠:配方优化,质控严格,理化性质稳定,原液可反复高压灭菌,实验重复性佳。

 

物理性质及指标

外观:…………………….无色至淡黄色液体

密度:……………………1.130±0.005 g/mL

渗透压:………………….max. 25 mOsm/kg·H2O

电导率:………………….max. 100 mS/m

pH:……………………….9.0±0.5

粘度:……………………..max. 15 cP

 

生产工艺

本产品使用注射用水(Water-For-Injection)配制,生产程序参考GMP管理规定,并在净化车间中完成。公司已取得ISO9001质量体系认证。

 

保存条件

室温下未开封储存长达5年。开启后应储存于2~8℃环境中。

运输条件

常温运输。

 

使用方法

请详见说明书。

 

实例验证数据

  1. PBMC分离效果

方法:

(1)3mL 60%浓度分离工作液配制:分别使用Meiluncell®全能细胞分离液(PWL668)和进口C品牌(17-0891)配制60%工作液。取15mL离心管,加入180μL 10×PBS(MA0016)、1.2mL 1×PBS(MA0015)和1.62mL分离液。

(2)PBMC分离及流式检测:

① 健康C57小鼠眼眶取血(加0.1% EDTA抗凝),用1×PBS稀释至2mL;

在分离工作液最上层,缓慢加入1mL稀释后的全血;

② 将混合液置于水平转子离心机中,800×g离心10min,在工作液和血浆层之间形成一层细胞白膜;

③ 用移液枪自上而下缓慢吸走血浆层,然后再同样自上而下吸取含细胞的白膜层(约1mL);

④ 加入到另一个含4mL 1×PBS的干净15mL离心管内,轻吹混匀后,800×g离心10min,弃去上清,获得细胞;

⑤ 随后,用200μL含2% BSA的1×PBS重悬细胞,转移至96孔板内,加入相应流式抗体,冰上孵育20分钟,流式上机检测CD3、CD19、CD4、CD8标志物情况。

结果:

  • 如图1所示,离心后,Meiluncell(PWL668)分层效果与进口C品牌(17-0891)基本一致,均能将目标细胞截留在密度梯度层以上。

图1. 分离液获取PBMC分层效果的比较

  • 流式检测结果(图2)显示,所得细胞中,CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞各细胞间比例,Meiluncell(PWL668)分层效果与进口C品牌(17-0891)几乎无差别。

图2. 所分离PBMC中CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞的比例情况

 

  1. 自发形成的密度梯度情况

方法:分别用Meiluncell®全能细胞分离液(PWL668)和进口C品牌(17-0891)配制50%工作液,30000×g离心15min,自上而下每0.4-0.7mL取一次样品,用密度计测其密度,比较自发形成的密度梯度情况。

结果:如图3所示,Meiluncell(PWL668)能够自发形成稳定的梯度密度层,其密度分布与进口C品牌(17-0891)相近。

图3. 分离液自发形成密度梯度分布情况

注意事项

  1. 本产品离心后易在离心管底、管壁残留二氧化硅沉淀,干燥后难以清洗,实验结束后需立即水洗设备;优先选用聚碳酸酯(PC)材质离心管。
  2. 本产品在pH 5.5-10.0区间内性能稳定;pH<5.5、含Ca2+、Mg2+等二价阳离子或高温环境,均会诱发胶体二氧化硅胶凝失稳,实验需规避低pH、高盐及含二价离子体系。
  3. 所有硅胶胶体在长期储存时形成聚集体是一种固有趋势。这些聚集体可能在某些批次的产品中观察到,表现为管底的轻微沉淀物或密度为1.04至1.05 g/mL的淡白色条带。该条带可能在离心机形成梯度时或预形成梯度的低速离心过程中形成。聚集的硅胶不会干扰生物颗粒的分离,且几乎所有细胞和细胞器在分离液中的浮力密度均大于1.05 g/mL。对于大多数细胞、病毒和细胞器的分离,从梯度材料中带出的任何二氧化硅聚集体均可忽略不计。
  4. 本产品为无菌包装,请注意无菌操作,防止污染。如果有额外的灭菌需求,仅可对Meiluncell®全能细胞分离液原液进行121℃、30分钟高压灭菌(因为含盐、蔗糖体系易引发产品胶凝或焦糖化),不可采用0.22μm过滤除菌。灭菌过程中需减少产品与空气接触,防止气液界面生成固体颗粒,建议使用窄口瓶封装;若产生颗粒,可通过0.45μm过滤或500×g低速离心5分钟去除。灭菌后若出现液体体积损耗,可补充对应体积蒸馏水,不会改变产品密度。
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  6. 本产品仅限科研使用。

 

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