Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒

产品描述

本试剂盒用于检测细胞凋亡早期的发生，其中Annexin V为胞内蛋白膜联蛋白家族成员，以钙离子依赖的方式选择性与磷脂酰丝氨酸（PS）结合。

PS正常分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把PS外翻到细胞膜外侧。用带有FITC标记的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以通过流式细胞仪或荧光显微镜检测到PS外翻这一细胞凋亡的重要特征。

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，在嵌入DNA后释放红色荧光。PI不能穿透完整的细胞膜，但可以穿透坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

FITC最大吸收波长为490nm，发射波长为525nm，PI-DNA复合物的最大吸收和发射波长分别为535nm和615nm。

实验数据

图1. 在凋亡激活剂2孵育C6细胞（大鼠神经胶质瘤细胞）1.5小时后，使用我公司Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测染色效果图。仅被绿色荧光染色的为凋亡前期细胞，被绿色和红色双染的是凋亡晚期或坏死细胞。

图2. 使用我公司Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒染色后流式细胞仪检测效果图。A549细胞（人非小细胞肺癌细胞）用100μM凋亡激活剂2作用5小时后，未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出，未经染色的是双阴性细胞(A)，仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞，仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞，Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的早期凋亡细胞和双阳性的晚期凋亡细胞。出现的非预期的细胞点完全在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

保存条件

2～8℃避光保存，自生产之日起12个月有效。Annexin V-FITC不可冷冻。

运输条件

湿冰运输（按季节）。

注意事项

1. 可立式离心管内试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）是光敏物质，在保存与操作时请注意避光。
3. 在细胞洗涤的最后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留影响实验结果。
4. 为获得准确试验结果，建议样品在染色后1小时内进行分析。
5. 为了您的安全和健康，请穿戴实验防护服、手套、口罩等必要的防护装备。