一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光）

产品描述

细胞凋亡（Apoptosis）的一个显著特点是细胞染色体DNA的降解，在一些内源性核酸内切酶的作用下，核小体间的DNA被切断，从而产生不同长度的寡聚核小体片段，表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的180-200 bp DNA Ladder图谱，而坏死细胞的DNA呈弥漫的连续图谱。

美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)采用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling)方法，其原理为：末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)在凋亡细胞断裂DNA的3´-羟基(3´-OH)末端催化掺入荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量检测。

本试剂盒灵敏度高、特异性强、使用方便快捷。对于经过固定和洗涤的组织样本（石蜡切片、冰冻切片）和细胞样本（贴壁细胞、悬浮细胞），只需经过一步染色，洗涤后便可以进行凋亡检测。本试剂盒还提供了DNase I阳性对照和Proteinase K，以便操作。以50μL加样量为标准，MA0223-1可测定20次，MA0223-2可测定50次。

产品优势

★  使用方便快捷，对于经过固定和洗涤的组织样本（石蜡切片、冰冻切片）和细胞样本（贴壁细胞、悬浮细胞），只需经过一步染色，洗涤后便可以进行凋亡检测。

★  本试剂盒还提供了DNase I阳性对照和Proteinase K，以便操作。

★  灵敏度高、特异性强、检测效果好。

数据展示

对照实验：采用某国内知名品牌TUNEL检测试剂盒作为对照，在相同的实验条件下，用Apoptosis Activator 2处理C6细胞，荧光显微镜观察细胞凋亡后的荧光染色情况。

检测结果：如图1所示，美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒灵敏度明显更高，染色效果更好。

图1. 使用美仑TUNEL细胞凋亡检测试剂盒与其他品牌检测效果的比较

保存条件

-20℃避光保存，自生产之日起12个月有效。

运输条件

湿冰运输。

操作方法

请参考说明书。

注意事项

1.配制TUNEL检测液之后的步骤注意避光操作。

2.若配制TUNEL检测液操作时间较长，请将TdT Enzyme (10×)、FITC-12-dUTP Labeling Mix和配好的检测液置于冰上暂时保存。

3.需自备PBS或HBSS，抗荧光衰减封片剂（美仑货号：MA0235或MA0236-含DAPI），组织固定液（美仑货号：MA0192）或4%多聚甲醛，Triton X-100，二甲苯，无水乙醇等。

4.PBS或HBSS清洗后，为了各种反应的有效进行，请尽量除去PBS或HBSS溶液后再进行下一步反应。

5.结果分析时注意：在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA片断，从而引起假阳性结果；而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全，以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应，进而产生假阴性结果。

6.为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。