产品简介
- 细胞凋亡（Apoptosis）的一个显著特点是细胞染色体DNA的降解，在一些内源性核酸内切酶的作用下，核小体间的DNA被切断，从而产生不同长度的寡聚核小体片段，表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的180-200 bp DNA Ladder图谱，而坏死细胞的DNA呈弥漫的连续图谱。
- 美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)采用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling)方法，其原理为：末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂DNA的3′-羟基(3′-OH)末端催化掺入四甲基罗丹明-脱氧三磷酸尿苷(TRITC-dUTP)。TRITC-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量检测。以50μl加样量为标准，本试剂盒可测定20次。
产品优势
使用方便快捷，对于经过固定和洗涤的组织样本（石蜡切片、冰冻切片）和细胞样本（贴壁细胞、悬浮细胞），只需经过一步染色，洗涤后便可以进行凋亡检测。
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- 本试剂盒还提供了DNase I阳性对照和Proteinase K，以便操作。
- 灵敏度高、特异性强、检测效果好。
对照实验：采用某国内知名品牌TUNEL检测试剂盒作为对照，在相同的实验条件下，用Apoptosis Activator 2处理Hela细胞，荧光显微镜观察细胞凋亡后的荧光染色情况。
检测结果：如图1所示，美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒灵敏度明显更高，染色效果更好。
使用美仑TUNEL细胞凋亡检测试剂盒与其他品牌检测效果的比较
储存条件：
-20℃避光保存，有效期一年。
- 操作方法
- 请参考说明书。
注意事项
- 配制TUNEL检测液之后的步骤注意避光操作。
- 若配制TUNEL检测液操作时间较长，请将TdT Enzyme (10×)、TRITC-dUTP Labeling Mix和配好的检测液置于冰上暂时保存。
- 需自备PBS或HBSS，抗荧光衰减封片剂（美仑货号：MA0221或MA0222），组织固定液（美仑货号：MA0192）或4%多聚甲醛，Triton X-100，二甲苯，无水乙醇等。
- PBS或HBSS清洗后，为了各种反应的有效进行，请尽量除去PBS或HBSS溶液后再进行下一步反应。
- 结果分析时注意：在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA片断，从而引起假阳性结果；而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全，以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应，进而产生假阴性结果。
- 为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。