产品描述
- Meilunbio®脂质体基因转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂 ，其DNA细胞转染效率不弱于、甚至优于Lipo2000，并且毒性更低，可替代Lipo2000使用。
- 本产品适合于将DNA转染入真核细胞，在合适的转染试剂/DNA比例条件下，其细胞毒性极低；转染时血清的存在不影响转染效果。
- 本产品适用范围：大多数贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。
- 本产品为无菌溶液。一般条件下24孔板转染，每次使用约2μL，则1.5mL规格可做约750次转染。
产品优势
- 高转染效率：本产品适用于大多数真核细胞，且转染效率＞80%；
- 无明显细胞毒性：转染后细胞形态良好，72小时内不更换培养液也无明显细胞毒性；
- 多场景兼容：支持大多数贴壁/悬浮真核细胞的瞬转和稳转；
- 操作便捷：抗血清干扰，脂质体复合物可直接加入到含血清培养基中。
实验数据
1.与进口对照转染效率比较
方法：分别使用我司MA0672和进口对照（T公司Lipo2000）对不同细胞转染pEGFP-N3质粒，48小时后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况，判断转染效率。
结果：在293T、CHO-K1、Hela这三种细胞中，我司MA0672转染效率均高于进口对照，即绿色荧光比例较高；在LNCaP、NIH-3T3细胞中，我司MA0672转染效率与进口对照相近；在HepG2细胞中，我司MA0672转染效率略低于进口对照。
图1. 不同细胞转染效率比较
2.不同剂量的转染效率比较
方法：使用我司MA0672不同剂量对不同细胞转染相同量pEGFP-N3质粒100ng（96孔板），48小时后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况，判断转染效率。
结果：所有四种细胞系的GFP表达都表现出明显的MA0672剂量依赖性，但不同细胞的最佳转染剂量有所不同，一般在1:3~1:5的范围内优化 DNA (μg)和 转染试剂 (μL) 的比例。
图2. 不同剂量转染试剂的转染效率比较
保存条件
2~8℃保存，避免冷冻，自生产之日起12个月有效。
运输条件
常温运输。
注意事项
- 质粒 DNA 转染的优化：为达到最好的转染效果和降低转染试剂细胞毒性的影响，可以对 DNA和转染试剂的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:1~1:6的范围内优化 DNA (μg)和 转染试剂(μL) 的比例。
- 通常 DNA-转染试剂复合物和细胞一起孵育6小时已经足够产生较高的转染效率。大多数细胞在本产品转染后长达72小时未见明显细胞毒性。但转染后6小时更换新鲜培养基对于一些生长非常迅速的细胞 有助于提高转染效率；对于一些易于转染的细胞如HEK 293T细胞，换液可视细胞生长状况而定，无需为提高转染效率而换液。
- 使用高纯度的DNA（A260/280 比值越接近1.8越好）有助于获得较高的转染效率。
- 根据实验需求，提前计算好需用的总DNA量和转染试剂用量，大体积地制备，可以减少误差。
- 本产品在不同细胞上的转染效率不同，转染试剂的添加量需要摸索，具体请参考附表。
- 本产品为无菌包装，无需过滤，请注意无菌取用。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
附表. 常见细胞的转染效率(仅供参考，实验条件不同转染效率会有差别)
| 细胞 种类 |
293 | HCT116 | WRL-68 | HepG2 | NIH/3T3 | THP-1 | Hela | MCF7 | 293T | TS cell | HO1980 | A549 |
| 转染 效率 |
>80% | >80% | ~80% | ~80% | ~80% | >50% | >80% | >80% | >80% | >60% | >60% | >80% |
| 细胞 种类 |
MEF | CHO-K1 | Hep3B | C2C12 | Neuro2a | HUVEC | MDCK | Hep2C | WEHI | B50 | Calu1 | L929 |
| 转染 效率 |
>50% | >50% | >80% | >80% | >70% | >80% | >80% | >80% | >80% | >70% | >70% | >70% |
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