产品简介
2×Taq Master Mix (Dye Plus)是即用型2×PCR预混合溶液,包含高纯度的基因工程改造的Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系,只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增,可有效扩增3kb以内的DNA片段,减少了移液操作,提高了检测通量和结果的重现性。此外,本产品含有电泳指示剂,可在PCR反应完成后直接点样进行电泳。
本产品适用于常规PCR扩增,扩增产物3’端带A(粘性末端),可直接用于TA克隆。
产品优势
- 高扩增效率:延伸速率可达到10~15sec/kb;
- 操作便捷:本产品为2×预混液,加入引物、模板和ddH2O即可进行扩增;PCR产物含有染料可直接进行电泳;
- 适用性广:适用于常规PCR扩增;PCR产物具有3’-dA突出端,可直接用于T载体克隆。
数据展示
- 不同物种来源模板扩增效果
方法:分别以大豆DNA、小鼠cDNA、菌落样品为模板,使用2×Taq Master Mix扩增1~5kb片段,PCR反应结束后进行核酸电泳检测。
结果:如图1 所示,MA0682对不同物种来源模板均有较好的扩增效果。
图1. 2×Taq Master Mix对不同物种来源模板扩增效果
保存条件
-20℃保存,避免反复冻融,自生产之日起24个月有效。
运输条件
湿冰运输。
注意事项
1、为了提高扩增成功率和产量,请使用高质量的模板进行扩增。
2、本产品应避免反复冻融,短期内多次使用可置于2~8℃保存。
3、本产品不可用于细菌16S鉴定。
4、为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
常见问题与解答
问题 | 可能原因 | 建议 |
扩增无产物或产物量少 | 引物特异性差 | 优化引物设计 |
退火温度不合适 | 设置退火温度梯度,找到合适的退火温度 | |
延伸时间不足 | 适当增加延伸时间至20~30sec/kb | |
循环数少 | 适当增加5~10个循环 | |
模板降解或模板纯度差 | 电泳检测模板质量,使用高纯度模板 | |
模板浓度低 | 使用量参照反应体系推荐量调整并适当增加 | |
扩增产品有杂带或弥散条带 | 引物特异性差 | 优化引物,避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增 |
引物浓度过高 | 降低引物浓度 | |
模板过量或纯度差 | 减少模板量,使用高质量模板 | |
退火温度过低 | 尝试提高退火温度并设置退火温度梯度 | |
循环数过多 | 减少循环数至25~30 cycles |
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