CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒

¥300.00¥500.00

英文名字:CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit

质量标准:Meilunbio

货号: MA0697

产品描述

CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒基于一种新型荧光探针CFDA SE(Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester),用于检测细胞增殖和细胞荧光示踪。

该试剂盒的主要工作原理为:CFDA SE是二乙酸荧光素(FDA)的衍生物,是一种可穿透细胞膜的荧光染料,其本身不具有荧光发光性,当通过被动运输进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE),可发出强烈的绿色荧光,共价结合的荧光分子很少从细胞内脱落。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,因此通过流式细胞仪检测,根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞、分裂一次(1/2的荧光强度)、二次(1/4的荧光强度)、三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFDA SE可检测细胞分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定且均一,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。

CFDA SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=492 nm,Em=517 nm,用荧光显微镜和流式细胞仪进行均一染色的细胞示踪观察,可以应用到免疫学的多个领域。CFDA SE最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞、自然杀伤细胞、造血祖细胞等其他细胞的增殖检测等。

 

产品优势:

  • 方便快捷:试剂盒包含配制CFDA SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液,简化了实验前期准备工作。
  • 标记效果好:CFDA SE标记细胞后荧光明亮、分布均一;可以追踪细胞在体内和体外的分裂增殖过程。
  • 安全稳定:对细胞生理活动没有影响;标记的荧光可以维持长达数周。
  • 兼容性好:进入细胞后荧光不受内环境影响,可检测各种不同来源细胞,适用于不同培养体系。

 

保存方法:

-20℃保存,自生产之日起12个月有效。其中CFDA SE荧光探针需要干燥避光保存。

 

注意事项:

  1. 所有试剂在使用前均需彻底解冻、混匀,混匀过程中尽量避免产生气泡;CFDA SE溶剂在较低温度下会凝固,请于20-25℃水浴片刻至全部融化后再使用。
  2. 试剂中含有荧光染料,保存或进行标记时尽量避光操作,以避免荧光淬灭问题。
  3. 不同细胞的内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。可根据细胞类型及培养条件摸索最佳工作浓度。
  4. 若需要对细胞进行固定,请用醛类固定剂如3.7%多聚甲醛于室温固定15 min;之后若还需要进行其他如抗体标记,请用冰丙酮透化处理细胞10 min。
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

实验数据:

在使用CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒标记细胞完成后的第0-7天分别用流式细胞仪检测,记录不同分裂次数细胞群的荧光强度;并在荧光显微镜下观察细胞染色情况,拍照记录。

如图1所示,CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒标记细胞效果好,荧光强度高;如图2所示,荧光能够正常的随着细胞分裂而减弱,流式拟合出的增殖峰图中不同分裂次数的细胞峰可被明显区分。

 

图1 CFDA SE试剂盒标记细胞后0-7天荧光显微镜图

图2. CFDA SE试剂盒标记细胞后0-7天流式检测拟合峰图

 

规格

500T, 1000T

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