产品简介
1.1×Hi-Fidelity PCR Master Mix (Dye Plus)采用了新一代Hi-Fidelity DNA Polymerase，具有高保真性（错配率是普通Taq酶的1/30）及快速扩增（延伸速度为10~15sec/kb）的特点。
本产品是即用型1.1×PCR预混合溶液，包含Hi-Fidelity DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行扩增反应时，体系中只需加入引物和模板即可，简化了实验操作步骤，提高了实验通量和结果的重复性。此外，本产品含有电泳指示剂，可在PCR反应完成后直接点样进行电泳。本产品扩增产物为平末端，可适用于One Step Seamless Cloning Kit （美仑货号：MA2000）。
本产品适用于以试剂盒提取的基因组DNA、cDNA和质粒DNA为模板的PCR反应。
产品优势
- 高保真度：保真性是Taq酶的30倍；
- 高扩增速率：扩增速度最高可达到10sec/kb，30sec/kb可高效扩增绝大多数片段；
- 强耐热性：98℃热处理1h后聚合酶活性无明显变化；
- 操作便捷：本产品为1.1×预混液，加入引物和模板即可进行扩增；PCR产物含有染料可直接进行电泳；
- 适用性广：适用于大多数来源模板的扩增，如基因组DNA、cDNA和质粒DNA等。
数据展示
- 不同物种来源模板扩增效果
方法：分别以拟南芥DNA、水稻cDNA、小鼠DNA、质粒DNA样品为模板，使用1.1×Hi-Fidelity PCR Master Mix扩增不同长度片段，PCR反应结束后进行核酸电泳检测。
结果：如图1 所示，MA2001对不同物种来源模板均有较好的扩增效果。
图1. 1.1×Hi-Fidelity PCR Master Mix对不同物种来源模板扩增效果
- 高GC模板扩增效果
方法：以人基因组DNA为模版，使用1.1×Hi-Fidelity PCR Master Mix扩增GC含量在60%~70%含量的4个DNA片段（0.5~3kb），PCR反应结束后进行核酸电泳检测。
结果：如图2 所示，MA2001对高GC基因具有较好的扩增性能。
图2. 1.1×Hi-Fidelity PCR Master Mix对高GC模板扩增效果
保存条件
-20℃保存，自生产之日起24个月有效。
运输条件
湿冰运输。
注意事项
1、为了提高扩增成功率和产量，请使用高质量的模板进行扩增，如试剂盒提取的基因组DNA。请勿使用dUTP或含尿嘧啶的引物与模板。
2、本产品应避免反复冻融，短期内多次使用可置于2~8℃保存。
3、本产品不可用于细菌16S鉴定。
4、本产品仅适用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题与解答
| 问题 | 可能原因 | 建议 |
| 扩增无产物或产物量少 | 引物特异性差 | 优化引物设计 |
| 退火温度不合适 | 设置退火温度梯度，找到合适的退火温度 | |
| 延伸时间不足 | 适当增加延伸时间至20~30sec/kb | |
| 循环数少 | 适当增加5~10个循环 | |
| 模板降解或模板纯度差 | 电泳检测模板质量，使用高纯度模板 | |
| 模板浓度低 | 使用量参照反应体系推荐量调整并适当增加 | |
| 扩增产品有杂带或弥散条带 | 引物特异性差 | 优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增 |
| 引物浓度过高 | 降低引物浓度 | |
| 模板过量或纯度差 | 减少模板量，使用高质量模板 | |
| 退火温度过低 | 尝试提高退火温度并设置退火温度梯度 | |
| 循环数过多 | 减少循环数至25~30 cycles |
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