快速动物组织总RNA提取试剂盒（双离心柱型）

产品简介

快速动物组织总RNA提取试剂盒（Animal Tissue Total RNA Extraction Kit）是基于硅胶柱纯化技术的双离心柱式总RNA提取试剂盒。试剂盒采用膜过滤技术，可更大程度的去除基因组DNA，高效且专一的得到总RNA。

本产品适用于从≤20 mg动物软组织（肝脏、脾脏、肾脏、脑等）中快速提取总RNA。整个提取流程可在30分钟内完成，无需使用DTT及β-巯基乙醇。提取的总RNA纯度高、完整性好，最大程度减少了DNA、蛋白等杂质污染，可直接用于RT-PCR、qRT-PCR、Northern Blot、芯片分析、Dot Blot、Poly A筛选、体外翻译、RNA酶保护分析及分子克隆等实验。

产品优势

• 省时高效：30min内即可完成多个样品的总RNA提取；
• 安全低毒：无需使用DTT、β-巯基乙醇等具有毒性的试剂，操作安全性更高；
• 基因组DNA去除高效：采用独特的基因组DNA过滤柱，无需DNase处理，可高效去除基因组DNA；
• RNA纯度高：提取所得的RNA无杂质残留，能够适配对RNA纯度和完整性有严苛要求的下游实验。

数据展示

• 动物组织提取总RNA效果

方法：分别使用美仑快速动物组织总RNA提取试剂盒（双离心柱型）及同类竞品Product A，同时提取小鼠肝脏和小鼠肾脏总RNA，进行琼脂糖凝胶电泳验证。

结果：如图1 所示，MA2008提取的动物组织RNA质量高、完整性好。

图1. 快速动物组织总RNA提取试剂盒提取的动物组织RNA电泳图

保存条件

Proteinase K置于-20℃保存，其余组分常温保存。自生产之日起12个月有效。

运输条件

湿冰运输。

注意事项

1. 使用前请一定按照使用说明2的要求配制相关溶液。
2. RNA在Buffer FRL中时不会被RNase降解，但提取后继续处理过程中如果需要用到塑料和玻璃器皿则应使用RNase-Free的。玻璃器皿可在150℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用RNase-Free水彻底清洗，再灭菌。更建议使用一次性的RNase-free实验器具，并且RNA实验专用，不要用于其它实验，避免交叉污染。
3. 为了预防RNase污染，请经常更换新手套，以防止来自皮肤表面的RNase污染物。
4. 提取RNA过程建议在专门做RNA的超净台中进行，如有必要请提前喷洒核酸酶清除试剂。
5. 为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

常见问题与解答

问题	可能原因	建议
RNA得率低	样品裂解不充分	建议参考说明书充分研磨、振荡样品，使样品充分裂解
	样品用量过多	建议按照说明书要求适量取样
	洗脱不充分	RNase-Free ddH2O需直接加到膜中央，并静置2min 后再离心，必要时可进行二次洗脱以提高产量
	吸附柱有乙醇残留	使用Buffer FRW1漂洗后需要开盖晾干吸附柱中的乙醇
RNA降解	样品处理或保存不当	尽量使用新鲜样品或者解冻次数不超过两次的样品
	样品过量，影响裂解液的裂解能力，造成RNase未被充分抑制，导致RNA降解	请参考使用说明推荐取样量，若要增加样品起始量，则后续实验中各溶液量均要等比例增加。对于内源RNase含量较多的组织应减少样品量，可适当增加裂解液用量
	电泳过程中发生降解	使用RNase-Free的Loading Buffer、琼脂糖和缓冲液等
	环境、试剂或耗材中含有RNase	使用RNase-free的试剂及耗材，建议在超净台中操作
DNA污染	样品裂解时加入的试剂量过少	请参考使用说明推荐试剂量
	去除基因组DNA的操作不够	若DNA含量较多，可延长DNase I消化时间或重复消化
	次生代谢物较多	次生代谢物含量高的样本在提取RNA时易出现基因组的污染
过滤柱堵塞	样品用量过多	裂解液粘稠，减少样品量或加大裂解液用量，样品量过多反而会降低产量和纯度
	裂解离心不充分	组织裂解液需高速离心去除杂质，杂质会引起柱子的堵塞，转移上清液尽量不要吸到杂质。如gDNA过滤柱发生堵塞，可增加离心次数、时间或转数；或者可将滤液吸出加入适量裂解液匀浆后再转移至新的gDNA过滤柱中
	离心温度过低	本产品使用操作均在室温下进行

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