产品简介
Meilunbio®原代巨噬细胞专用转染试剂是一款美仑生物全栈自研的新型核酸转染试剂。经在小鼠原代巨噬细胞(BMDM)上的多次测试,其效果达到甚至超过了目前主流转染试剂,完美适配原代巨噬细胞的mRNA转染需求,并且血清和抗生素兼容,有利于维持细胞的最佳状态。
本产品使用非常简便,无需对转染试剂进行稀释:可将计算量转染试剂直接加入到核酸稀释液中,孵育10-15分钟即可加样。
本产品为BMDM细胞转染专用试剂。
本产品为无菌溶液。一般条件下24孔板转染,每次使用约1μL,则1mL规格可做约1000次转染。
产品优势
- 高转染效率:本品的mRNA转染效果达到甚至超过了目前主流转染试剂,成功率接近100%;
- 无细胞毒性:不受血清和抗生素影响,无需更换细胞培养液;
- 操作简便:转染试剂无需稀释,直接向稀释后的核酸中加入孵育即可;
- 容错率高:兼容市面各转染试剂配置方案,无需担心用错方法。
数据展示
- mRNA转染效果
方法:分别使用我司MA3001和进口T品牌的相应产品对原代巨噬细胞转染EGFP mRNA,24小时后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,判断转染效果。
结果:多个视野下荧光结果显示,我司自研产品MA3001在原代巨噬细胞上的转染效果显著优于进口对照,实现转染难题的有效攻克。

图1. 原代巨噬细胞转染mRNA效果比较
保存条件
-20℃,自生产之日起12个月有效。建议第一次使用时按照每次实验所需量进行分装保存。若短期使用,可保存于2~8℃,5个月有效;若想长期保存,可置于-80℃,24个月有效。
运输条件
湿冰运输。
使用方法
请详见说明书。
注意事项
- 本产品的推荐用量:mRNA/转染试剂=1:2(μg/μL),但转染试剂使用量受细胞状态及其他实验因素影响,建议初次使用时可固定mRNA用量(如:24孔板,推荐500ng),在mRNA/转染试剂=1:0.5~1:7(μg/μL)的范围内,设置转染试剂用量梯度,以筛选出最佳转染用量。
- mRNA的初始储备浓度宜控制在0.5-5μg/μL范围内。
- 原代巨噬细胞的生长、贴壁状态非常影响转染效率!请务必选择6-8周龄健康实验小鼠进行骨髓细胞提取、并选择高纯度M-CSF对提取细胞进行诱导,建议直接在拟使用的孔板内(如:24孔板)进行细胞诱导处理,待细胞生长至合适状态后换液即可使用(细胞消化会影响转染效果,不建议消化后铺板再转染)
- 选择同一批次小鼠、合并多只小鼠的原代巨噬细胞可降低摄取差异造成的风险,提高转染成功率。
- 细胞培养基的pH值偏低(颜色偏黄),会显著影响转染效果;如若此时不好完全换液,可选择半数换液法:即吸走一半上清,补加一半完全培养基。
- 请务必保证原代骨髓细胞提取过程保持无菌状态。
- 本产品为无菌包装,无需过滤,请注意无菌取用。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
表1. 不同细胞培养器皿中mRNA及转染试剂用量参考表(仅供参考)
| 操作步骤 | 96-well | 48-well | 24-well | 12-well | 6-well | 6cm dish | 10cm dish | |
| ① | Optimal-MEM培养基 | 5μL | 12.5μL | 25μL | 50μL | 125μL | 250μL | 500μL |
| ② | mRNA | 0.1μg | 0.25μg | 0.5μg | 1μg | 2.5μg | 5μg | 15μg |
| ③ | 转染试剂 | 0.2μL | 0.5μL | 1μL | 2μL | 5μL | 10μL | 30μL |
| 加入mRNA后轻吹打混匀,加入转染试剂后轻吹打混匀,室温孵育10-15分钟即可使用。 | ||||||||
| ④ | 每孔复合物加入量 | 5μL | 12.5μL | 25μL | 50μL | 125μL | 250μL | 500μL |
| 按上述用量,每孔均匀滴加复合物,放回培养箱直接继续培养,通常无需换液。 | ||||||||
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| PWL213 | Bright-FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100T/1000T/1000T×10 |
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