产品简介
Meilunbio® siRNA专用细胞转染试剂是一款美仑生物全栈自研的新型核酸转染试剂,经多种细胞上测试,其siRNA转染效果达到甚至超过了目前主流转染试剂,完美适配siRNA的高效转染需求,并且血清和抗生素兼容,有利于维持细胞的最佳状态。
本产品使用非常简便,无需对转染试剂进行稀释:可将计算量转染试剂直接加入到核酸稀释液中,孵育10-15分钟即可加样。
本产品为siRNA转染专用试剂。
本产品为无菌溶液。一般条件下24孔板转染,每次使用约1μL,则1mL规格可做约1000次转染。
产品优势
- 高转染效率:本品的siRNA转染效果达到甚至超过了目前主流转染试剂;
- 无细胞毒性:不受血清和抗生素影响,无需更换细胞培养液;
- 操作简便:转染试剂无需稀释,直接向稀释后的核酸中加入孵育即可;
- 容错率高:兼容市面各转染试剂配置方案,无需担心用错方法。
数据展示
- siRNA转染效果
方法:分别使用我司MA3002和进口T品牌的相应产品对THP-1细胞转染GAPDH siRNA,24小时后提取蛋白、Western Blot表征目标蛋白的表达情况并进行相对内参β-actin的灰度计算,判断siRNA转染效果。
结果:Western blot结果显示,我司产品MA3002的siRNA转染效果优于进口对照,可实现替代。

图1. THP-1细胞转染siRNA效果比较
保存条件
-20℃,自生产之日起12个月有效。建议第一次使用时按照每次实验所需量进行分装保存。若短期使用,可保存于2~8℃,5个月有效;若想长期保存,可置于-80℃,24个月有效。
运输条件
湿冰运输。
使用方法
请详见说明书。
注意事项
- siRNA的推荐浓度为15μM,但仍需根据目标靶点的敲减难易程度,在10-50μM范围内进行微调;调整时,MA3002与siRNA的用量比例尽量保持不变。
- 强烈建议!在正式实验前,通过转染荧光修饰siRNA、流式或荧光显微镜考察细胞siRNA摄取量来确定合适的转染试剂/siRNA比例以及siRNA用量,因为有效的细胞内siRNA摄取是siRNA高效敲低目标蛋白的关键前提。
- 某些siRNA的效果可能会引起细胞死亡,故在siRNA转染后的24h内,需留意细胞状态,若细胞形态发生明显变化或坏死,则需降低siRNA或转染试剂用量,或提早时间收样,确保收样时细胞维持相对良好形态,细胞一旦坏死,其胞内蛋白会立即发生降解。
- 细胞培养基的pH值偏低(颜色偏黄)时,会显著影响转染效果;如若此时不好完全换液,可选择半数换液法:即吸走一半上清,补加一半完全培养基。
- 本产品为无菌包装,无需过滤,请注意无菌取用。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
表1. 不同细胞培养器皿中siRNA及转染试剂用量参考表(仅供参考)
| 操作步骤 | 96-well | 48-well | 24-well | 12-well | 6-well | 6cm dish | 10cm dish | |
| ① | Optimal-MEM培养基 | 5μL | 12.5μL | 25μL | 50μL | 125μL | 250μL | 500μL |
| ② | siRNA | 3pmol | 7.5pmol | 15pmol | 30pmol | 75pmol | 150pmol | 450pmol |
| ③ | 转染试剂 | 0.2μL | 0.5μL | 1μL | 2μL | 5μL | 10μL | 30μL |
| 加入siRNA后轻吹打混匀,加入MA3002后轻吹打混匀,室温孵育10-15分钟即可使用。 | ||||||||
| ④ | 每孔复合物加入量 | 5μL | 12.5μL | 25μL | 50μL | 125μL | 250μL | 500μL |
| 按上述用量,每孔均匀滴加复合物,放回培养箱直接继续培养,通常无需换液。 | ||||||||
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