尼罗红

尼罗红；Nile red
分子式：C20H18N2O2 分子量：318.37
简介：亲脂性荧光染料。尼罗红（Nile Red），是一种脂质探针（lipophilic probe），能用于定位和定量细胞内的脂质，特别是中性脂滴。作为一种环境敏感型荧光探针，尼罗红在水和其他极性溶剂中基本无荧光，但在非极性环境中发生显著的荧光增强和吸光/发射光谱蓝移（Ex/Em ~552/636 nm，甲醇溶液），可用荧光显微镜或流式细胞仪检测。流式细胞术对尼罗红（单一染色）和尼罗红/抗CD3单克隆抗体（双标染色）的检测方法可用来监测外周血白细胞和淋巴细胞磷脂沉积（PLD）。
物理性状及指标：
外观：……………………浅绿色至红色至棕色粉末
熔点：……………………203~205°C
溶解性：…………………soluble in methanol（1 mg/mL ）
纯度：……………………≥95%
紫外最大吸收波长：……553 nm
紫外最大吸收波长：……530 nm & 635 nm（荧光反应）

储存条件：常温，避光防潮密闭干燥
用途及描述 ：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。 尼罗红是一种不带电荷的疏水性光稳定分子，在疏水环境中强烈发出鲜红色荧光。这种亲脂性染色剂通常用于通过荧光显微镜和流式细胞荧光测定法检测细胞内脂滴。尼罗红已经被证明可以检测由配体与钙调蛋白结合诱导的新疏水表面的形成，蜂毒蛋白的低聚或早期热变性过程中卵清蛋白的解折叠。该产品已用于染色细胞结构，以及可视化和定位胶体药物载体。尼罗红的荧光在pH 4.5和8.5之间不受影响，可用于稀释浓度以调查疏水性蛋白质位点。

使用方法推荐（仅供参考）：
一、工作液制备
1）母液准备：取适量的尼罗红用无水DMSO充分溶解制备1mM储存液，按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，避光保存。
2）工作液准备：用HHBS或生理缓冲液，pH 7将母液按1:1000稀释为1×尼罗红工作液，漩涡混匀。
【注】：尼罗红的实际染色浓度请参考文献或实验室体系来调整。
二、染色步骤
1）用检测化合物处理细胞一段时间；
2）离心并调整细胞浓度为1-5×105cell/管；
3）用500µl尼罗红工作液重悬细胞；
4）室温或37ºC避光孵育5-10min；
5）吸掉染色工作液，用HHBS或适当缓冲液清洗细胞；
6）用500µl预热的HHBS或培养基重悬细胞，使细胞密度为1-5×105cell/管；
7）荧光显微镜或流式细胞仪检测荧光信号，Ex/Em = 552/636 nm；
【注】
●对于贴壁细胞，可用HHBS或适当缓冲液清洗细胞，然后直接加入尼罗红工作液孵育。
●细胞也可预固定，然后用尼罗红工作液染色。

【注意 】
●我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
●部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。