乙酰苯肼(APH),用于HA造模

乙酰苯肼(APH),用于HA造模；N-Acetylphenylhydrazine

分子式：C8H10N2O分子量：150.18

简介：1-乙酰-2-苯肼(AcPhHZ)与氧血红蛋白发生反应，形成自由基，可用于诱导溶血性贫血对造血系统的研究。

物理性状及指标：

外观：…………………近白色或微黄色结晶性粉末

熔点：……………………129~132℃

溶解性：…………………易溶于热水和乙醇，微溶于乙醚和冷水

炽灼残渣：………………<0.1%

含量：……………………>98%

酸度：……………………<1.66 mole/100 g

敏感性：…………………对光敏感

生物活性及研究进展：

乙酰苯肼(Acetylphenyl hydrazine,APH)是一种强氧化剂,能特异地对红细胞起缓和而进行性地氧化损伤作用,尤其是干扰红细胞内的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,促进血红蛋白变性而形成海氏小体(Heinzbody),也可直接破坏红细胞的膜蛋白和脂类,使膜溶解破裂,红细胞崩解,造成溶血性贫血。据此,用乙酰苯肼来制造大鼠溶血性贫血模型。贫血的诊断主要依赖于检查外周血血红蛋白、红细胞等参数。红细胞形成过程中,晚幼红细胞脱核释放入外周血后,变成含有RNA和少量DNA碎片的网织红细胞,这种细胞在血管内进一步成熟,24～36h后变成成熟红细胞,故外周血网织红细胞的含量能够反映骨髓的增殖情况,相关参数可作为贫血诊断中的重要指标。目前,溶血性贫血的治疗尚无特别有效的药物,皮质激素虽有一定疗效,但长期应用可导致骨质疏松、水盐代谢紊乱等,故关于溶血性贫血治疗药物的研究也越来越多,有研究表明山莨菪碱可降低红细胞膜的渗透性、减少血细胞破坏、防止血栓形成等作用,可作为治疗溶血性贫血的有效药物。据WHO统计,药物氧化性溶血性贫血占药源性血液疾病的10.36%,且临床发病率逐年增高,故建立氧化性溶血性贫血的动物模型可为进行相关药物的治疗研究起重要作用。有研究通过制作溶血性贫血小鼠动物模型,并用当归多糖铁复合物进行治疗发现其具有一定的治疗溶血性贫血的作用,并存在量效关系;另有研究通过在溶血性贫血动物模型上使用复方阿胶浆进行治疗发现它能增强凝血因子凝血功能和骨髓造血功能,并可使HGB和MCH增加,对贫血可有很好的治疗作用;也有研究发现大剂量五味子酚可改善药物氧化性溶血性贫血模型的贫血状况。可见,溶血性贫血动物模型的应用对探索治疗溶血性贫血药物的研究非常重要。

美仑提供多种HA造模等科研试剂。

美仑相关产品推荐

MB5814	消旋山莨菪碱(标准品	Racanisodamine
MB5353	五味子酚（标准品）	schisanhenol

用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。本产品与氧合血红蛋白反应形成造血系统研究中用于诱导溶血性贫血的自由基。可用于溶血性贫血HA动物模型的建立。

使用方法举例（仅供参考）

APH溶血性贫血大鼠模型的建立

溶血性贫血(Hemolytic anemia,HA)是一种常见的贫血类型,是指由于某种原因使红细胞存活期缩短,破坏增加,超过了骨髓代偿能力所引起的一类贫血,是常见的造血系统疾病,目前尚无较好的治疗方法。采用了腹腔内注射乙酰苯肼的方法,成功制作了适合科学研究需要的溶血性贫血大鼠模型,并为今后进行药物氧化性HA的研究打下基础。

1材料和方法

1.1实验材料

1.1.1试剂注射用乙酰苯肼(acetylphenyl hydrazine)

1.1.2实验动物5周龄清洁级Srague-Dawley大鼠26只,雌雄不限,体重105～125g

1.2HA动物模型的制作将在本实验室生长良好的20只SD大鼠随机分为实验组和对照组,常规饲养,自由摄食饮水。实验组大鼠(10只)分别于实验的第1、4、7d腹腔内注射2%乙酰苯肼生理盐水溶液,第1d剂量为1ml/100g体重,第4、7d剂量减半为0.5ml/100g体重,对照组(10只)大鼠分别注射等量生理盐水。实验第8d检测实验室指标判断动物模型是否成功。

1.3评价实验方法

1.3.1一般生长状态观察包括一般行为、毛发、出血点及死亡情况。

1.3.2外周血常规参数测定于实验第8d采用断尾采血法采集大鼠血液,EDTA-K2抗凝,以BC-3000Plus全自动血液分析仪检测其外周血红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)等参数。血清间接胆红素(Indirect bilirubin,IBIL)、血浆游离血红蛋白(FreeHemoglobin,FHB)测定均按文献[1]进行。

1.3.3网织红细胞计数(Ret)实验第8d,在洁净干燥的试管中加入10g/L煌焦油蓝染色液2滴,快速加入等量新鲜采集未抗凝全血,立即混匀后室温放置10～15min,取1滴制成薄片,再行瑞氏染色后,油镜下进行网织红细胞计数,并保存图像。

1.3.4骨髓象检查在实验第8d采血完成后,断颈处死大鼠,钝性分离出股骨,用生理盐水将血液冲洗干净,并以细针小心吸取骨髓,制作骨髓涂片,瑞氏染色后油镜下观察并保存图像。

1.4统计学处理所有数据

APH其他动物造模方法

1．小鼠第1、4、7天皮下注射APH生理盐水溶液0.2g/kg、0.1g/kg、0.2g/kg，第9天造模成功，其他给药方法也可以造成此模型。

2．家兔以2％APH生理盐水溶液给实验动物皮下或肌内注射2～3次，剂量为0.1g/kg，即可建立溶血性贫血模型。

观察指标：一般生长状态观测，包括一般行为、毛发、出血点及死亡情况；外周血常规参数测定，如血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数和血红蛋白含量；血细胞化学指标变化，如中性粒细胞的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、三磷腺苷酸酶、琥珀酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸酶和网织红细胞计数，海氏小体，骨髓象检查等指标。

【模型特点】注射APH后，实验组动物陆续出现活动减少、毛发暗淡无光泽、摄食减少、体重下降、疲乏无力、嗜睡、皮肤苍白等现象。外周血血红蛋白和红细胞进行性下降；网织红细胞、海氏小体和白细胞总数则显著增多。中性粒细胞的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、三磷腺苷酸酶、琥珀酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸酶，骨髓均有不同程度异常变化。

【模型评估和应用】用注射强氧化剂APH的方法可制作出符合临床特征的溶血性贫血动物模型，APH用量可通过预实验摸索，上述剂量可供参考。本方法建模周期短，操作简便，模型动物症状和外周血象、血细胞的生化学变化与人类溶血性贫血基本相似，为研究实验性溶血性贫血提供了一种简易模型。

储存条件：常温，避光防潮密闭干燥。

运输条件：常温运输