分子式:V 分子量:75kDa
简介:虾血蓝蛋白(SHC)是一种源于对虾的高可溶性血蓝蛋白,可替代钥孔帽贝血蓝蛋白(KLH),作为载体蛋白与多肽、核酸、药物或毒素等低分子量分子偶联,使其具备高免疫原性。经测试,SHC具有与KLH相当的免疫原性,而其溶解度(尤其是在与半抗原偶联后)则显著高于KLH,从而使免疫原制备方案具有更大的灵活性。
别名:Keyhole limpet
物理性状及指标:
外观:……………………类白色固体
溶解性:…………………H2O≥100mg/mL
纯度:……………………>98%
蛋白长度:………………Full length protein
性质:……………………Native
种属:……………………Penaeus vannamei
储存条件:−20℃,避光防潮密闭干燥
运输条件:湿冰运输(按季节)
产品用途:科研试剂,广泛应用于分子生物学、细胞生物学、药理学等科研方面,严禁用于人体。
- 抗病毒作用:血蓝蛋白具有非特异性抗病毒功能。
- 抗菌作用:血蓝蛋白裂解产生的抗微生物肽与免疫反应有关。在甲壳类动物中,血蓝蛋白的裂解片段具有抗菌活性,能够抑制细菌和真菌的生长。
- 溶血和抗肿瘤活性:血蓝蛋白还具有溶血和抗肿瘤活性。
- 偶联半抗原:血蓝蛋白具有特异性结合抗原能力,可以作为载体蛋白与多肽、核酸、药物或毒素等低分子量分子偶联,使其具备高免疫原性。
生物活性:Hemocyanin是一种大的含铜呼吸蛋白。Hemocyanin是一种重要的非特异性先天免疫防御分子,具有酚氧化酶、抗病毒、抗菌、溶血和抗肿瘤活性。
使用方法:(来源文献,仅供参考)
1.SHC活化及半抗原偶联:
SMCC活化
(1)使用适量超纯水将SHC(未活化)冻干粉复溶为10 mg/mL的SHC溶液;
(2)向2 mL复溶后的SHC溶液中加入2 mL超纯水配制的SMCC溶液(5 mg/mL,现配现用);
(3)室温孵育60 min或37℃孵育30 min,期间需定时温和混匀;
(4)使用分子筛层析除去过量的SMCC。
与半抗原偶联
(1)将20 mg含有巯基的半抗原溶解于5 mL偶联缓冲液(83 mM sodium phosphate,0.1 M EDTA,0.9 M NaCl,0.1 mM TCEP,pH 7.2)中;(注意:1 mM TCEP不是必需的,它的主要作用是将半抗原的二硫键还原成巯基。)
(2)立即将半抗原溶液与活化后的SHC混合,室温反应2 h;
(3)使用分子筛层析除去EDTA。
2 .EDC活化与半抗原偶联
EDC活化
(1)EDC和NHS在使用前需平衡至室温;
(2)使用适量激活缓冲液(0.1 M MES,0.5 M NaCl,pH 6.0)将SHC(未活化)冻干粉复溶为1 mg/mL的SHC溶液;
(3)向1 mL上步配制的SHC溶液中加入4 mg EDC和0.6 mg NHS,混匀,室温反应15 min;
(4)向反应液中加入4µLβ-巯基乙醇使EDC失活;
使用分子筛层析除去过量的EDC、NHS和β-巯基乙醇。
与半抗原偶联
(1)向活化后的SHC溶液中加入等摩尔量的半抗原(溶解于PBS中),室温反应2 h;
(2)向上步反应液中加入终浓度为10 mM的羟胺(hydroxylamine)终止反应;
(3)使用分子筛层析除去过量的羟胺。