产品简介:
BL21 Star(DE3)超级感受态细胞,是一种可以用于将异源蛋白以超高水平表达的E.coli BL21 Star(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,在严格按照使用说明进行操作时,转化效率可以达到1.0±0.5×108cfu/μg DNA。
E.coli细胞具有内源性的mRNA降解小体(mRNA degradosome),其中包含由rne131基因编码的RNase E。BL21 Star(DE3)中rne131的基因突变,导致RNase E功能缺陷,增加了目的基因的mRNA稳定性,表现为重组蛋白的超高得率。
BL21 Star(DE3)是在BL21(DE3)的基础上改造而成,适合T7启动子驱动的重组蛋白诱导表达系统,比如常见的原核表达载体pET系列。同时含有大肠杆菌RNA聚合酶,也可用于非T7启动子表达载体(pGEX、pMAL等)的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高,所以不适合毒性蛋白的表达。
BL21 Star(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdSB(rB– mB–) gal dcm rne131 (DE3)。
保存条件:-80ºC保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
运输条件:干冰运输。
注意事项:
– 感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
– 感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞 的转化效率。
– 待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
– 感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
– 感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
– 通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
– 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
– 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。