产品简介:
pCMV-mCherry-GFP-LC3B基因表达质粒是以CMV为启动子,以红色mCherry和绿色GFP为荧光标签,能够在哺乳动物细胞中表达的源LC3B融合蛋白的质粒。
因为LC3蛋白是酵母自(autophagy)关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白,而在LC3蛋白家族(包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族)中LC3B的应用最为广泛,所以pCMV-mCherry-GFP-LC3B基因表达质粒可以用于细胞自噬的研究。在自噬小体与溶酶体的融合过程中,mCherry与GFP共同对 LC3B 进行标记,即便GFP的荧光在溶酶体酸性环境中被破坏,mCherry凭借其出色的稳定性,依然能保持红色荧光的发射。因此,借助融合表达mCherry-GFP-LC3B蛋白,能够十分高效地对自噬过程进行追踪。
本质粒为卡那霉素抗性,转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达融合蛋白的细胞株。
质粒主要信息:具体全序列请详询技术支持
Feature Nucleotide | Position |
mCherry | 698-1405 |
GFP | 1412-2125 |
LC3B | 2138-2515 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 2618-2639 |
SV40 polyA signal | 2651-3034 |
f1 origin of ss-DNA replication | 3172-3467 |
bla promoter | 3501-3625 |
SV40 promoter | 3465-3983 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 4018-4809 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 4810-5268 |
pUC origin | 5397-6064 |
使用说明:
- 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳或测序方法进行鉴定。
- 推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639): 5´- AATTAACCCTCACTAAAGGG-3´
T7 primer (2618-2639): 5´-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3´
保存条件:-20℃保存。
运输条件:湿冰运输。
注意事项:
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
质粒图谱: