D-荧光素钾盐,D-虫荧光素钾盐

¥200.00¥10,000.00

CAS 号: 115144-35-9
英文名字:D-Luciferinpotassium
质量标准:>98%,BR

分子式:C11H7N2O3S2K    分子量:318.41

产品简介:

D-荧光素(D-Luciferin)是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在 ATP 和萤光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与萤光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带萤光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用 ATP 对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-荧光素也常用于体外研究,包括萤光素酶和 ATP 水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。根据文献及客户使用习惯,目前使用荧光素钾盐的较为常见。

美仑自主研发的 D-荧光素钾盐,具有纯度高,溶解性好,发光强度高,衰减慢等特点,媲美进口产品。目前已经实现批量化生产,批产量高达公斤级。

别名:D-荧光素钾,D-虫荧光素钾;D-Luciferin potassium; Firefly luciferin potassium

物理性状及指标:

外观:………………………淡黄色粉末

溶解性:…………………..易溶于水(30mg/mL)

含量:……………………..>98%

储存温度: -20℃,避光防潮密闭干燥

运输条件: 湿冰运输(按季节)

产品用途

D-Luciferin 作为萤光素酶的底物,存在于多种发光生物体中。在 ATP 和萤光素酶的催化作用下,荧光素被氧化,产生蓝绿色的光(560nm),当底物过量时,产生的光量子数与萤光素酶的浓度呈正相关。编码萤光素酶的 Luc 基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常见报告基因。由于没有背景干扰,因此可以很 容易检测出低至 0.02 pg 水平的萤光素酶。广泛应用于活体成像报告基因检测等领域。

数据验证

  1. 结构确定(HNMR核磁氢谱)

图1. MB1834的核磁图谱。可以看出,MB1834结构正确。

  1. 纯度检测(HPLC高效液相)

图2. MB1834的HPLC谱图。可以看出,MB1834纯度>98%

  1. 溶解性测试

方法:室温条件下,用纯水作为溶剂测试D-荧光素钾盐溶解性,浓度为30mg/mL。

结果:MB1834在水中易溶解,澄清度良好。

图3. MB1834溶解度(30mg/mL)

  1. 荧光强度验证

方法:等量的萤火虫萤光素酶,分别加入含有300μg/mL D-荧光素钾盐的发光缓冲溶液(含 ATP、CoA、Mg2+ ),从反应初始时刻持续追踪萤光信号60s,对照产品为进口P公司。

结果:MB1834与进口对照在荧光强度及动力学指标上无显著差异。

图4-A. MB1834萤光信号强度检测

图4-B. MB1834萤光信号稳定性(动力学)检测

  1. 体外生物发光试验

方法:接种293T细胞,转染pML-NFκB-Fluc2-Neo质粒(美仑MA0504),24h后去除孔中培养基,加入含有150μg/mL D-荧光素钾盐的培养基,孵育5~10min,然后进行图像分析;每5min检测萤光信号一次,持续追踪40min。

结果:动力学曲线显示,MB1834作为底物的细胞生物发光衰减较慢,40min后萤光信号强度仅衰减25%左右。

图5. MB1834体外生物发光动力学曲线

  1. 活体成像试验

方法:将稳转细胞株(含luc基因)静脉注射进入裸鼠体内,30天后使用美仑D-荧光素钾盐尾静脉注射,注射进入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),进行成像分析。

结果:MB1834作为底物在体内也有较强萤光信号。

图6. MB1834体内活体成像结果

【注

  1. 保存和操作的过程中都要避光。如果有条件,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长。
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  3. 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用。
  4. 我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
关键词

D-Luciferin, potassium salt, D-Luciferin potassium salt, 萤火虫荧光素钾盐, Firefly luciferin potassium, Beetle Luciferin potassium

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