腔肠素-H

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CAS 号:50909-86-9
英文名字:Coelenterazine h
质量标准:>95%,进分

腔肠素-H;Coelenterazine h

本品为粉末形式供应的腔肠素h(Coelenterazine h),是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上,适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子,可用于检测活细胞中钙离子浓度。
分子式:C26H21N3O2 分子量:407.46
简介:腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
Coelenterazine h与Renilla荧光素酶或Gaussia荧光素酶使用具有一定的局限性。体外研究中比其他类似物更适合与钙离子激活发光蛋白共用。据报道,Coelenterazine h的发光强度高于天然腔肠荧光素10-20倍,因此是用来检测钙离子浓度微小变化的有力工具。
溶解性:溶于甲醇或者乙醇,不可溶于DMSO
储存条件:-20℃避光干燥保存,最好保存在惰性气体下以避免接触空气。
使用方法(仅供参考)
腔肠素溶解特性:腔肠素及所有衍生物都溶于乙醇或者甲醇,切忌溶于DMSO。腔肠素的水溶性相当低,一般情况需用酸化的甲醇配制高浓度母液后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作液,现配现用。
腔肠素母液的配制:称取1mg腔肠素h粉末直接溶解于205μl酸化的甲醇溶液(100%甲醇中含有20μl/ml 3M或者6M HCl),配制成12 mM(~5mg/ml,5×)的腔肠素h储存液。-20℃(最好-80℃)分装避光保存,可能会有少量活性的丧失,但可保存4周。若存放在惰性气体中可长期保存。
腔肠素工作液的配制:可直接用脱气蒸馏水(去离子水),PBS或者其他类型生理缓冲液稀释。现配现用。可直接用不含Ca2+/Mg2+的PBS缓冲液将12 mM的储存液稀释到2.5mM(~1 mg/ml)的工作液,4°C避光短暂存放。若是体外实验,需要使用前室温平衡15-20min。

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规格

250μg, 1mg

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