Oprozomib (ONX 0912)

Oprozomib(ONX 0912)是口服生物有效的抑制剂，抑制20S proteasomeβ5/LMP7的CT-L活性，IC50为36 nM/82 nM。

靶点

20S proteasome β5

20S proteasome LMP7

IC50

36 nM

82 nM

体外研究

Oprozomib的抗MM活性与caspase-8，caspase-9，caspase-3,和PARP的激活，及MM细胞的迁移和血管生成受抑制相关。

体内研究

Oprozomib处理啮齿类动物和狗，表现出的绝对生物利用度高达39％。Oprozomib按剂量重复口服处理大多数组织具有良好的耐受性，抑制>80％蛋白酶，处理多种人类肿瘤移植瘤和小鼠同系模型，诱导抗肿瘤反应。

MLN9708

MB5137

MG132,蛋白酶体抑制剂

MB2634

PSI(蛋白酶体抑制剂);Proteasome Inhibitor 1

MB4176

MG-132-(R)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8775 mL

9.3877 mL

18.7755 mL

5 mM

0.3755 mL

1.8775 mL

3.7551 mL

10 mM

0.1878 mL

0.9388 mL

1.8775 mL

50 mM

0.0376 mL

0.1878 mL

0.3755 mL

ELISA活性部位结合实验:
在室温下使用生物素化的活性位点探针PR-584（5-15μM）处理样品（裂解的细胞或组织匀浆）1小时。加入SDS (终浓度为0.9%)使样品变性，在100°C下加热5分钟。变性的样品转移到96孔或384孔过滤板上，与链霉亲和素琼脂糖珠(每孔2.5-5 μL 珠) 混合,在室温下在摇床上温育1小时。每孔使用100-200 μL ELISA buffer (PBS,1% 牛血清白蛋白,0.1% Tween-20)通过真空过滤冲洗珠5次。珠与抗体在摇床上4°C温育过夜。每孔使用100-200 μL ELISA buffer冲洗珠5次，然后与在ELISA buffer中按1:5000稀释的HRP标记的二抗在摇床上在室温下温育2小时。每孔使用100-200 μL ELISA buffer冲洗珠5次，测定化学发光信号。使用酶标仪测定发光值。读板器上测量发光值，并转换成ng蛋白酶体或μg/ml细胞裂解液，通过对照20S蛋白酶体或未处理的细胞裂解液的标准曲线。蛋白酶体抑制剂的研究中，活性位点探针结合值表示为与DMSO处理的细胞结合的相对百分数。

细胞实验：

• Cell lines:MM.1S, MM.1R, RPMI-8226, KMS12, INA-6, OPM-2, Dox-40
• Concentrations:~1 μM
• Incubation Time:48 小时
• Method:MTT实验

动物实验：

• Animal Models:携带非Hodgkin 淋巴瘤细胞系的RL移植瘤，肠肿瘤细胞系CT-26移植瘤的鼠
• Formulation:10% (v/v) EtOH 和10% (v/v) PS80 溶于柠檬酸盐缓冲液(pH 3.5)
• Dosages:30 mg/kg, 每周两次
• Administration:口服处理