STF-118804

STF-118804是高特异性NAMPT抑制剂。

靶点

NAMPT

体外研究

STF-118804降低包含MLL染色体翻译的B-ALL细胞系的活性， IC50值在毫微摩尔级范围。此外，取自5个小儿科ALL患者的白血病样品也对低毫微摩尔级范围的STF-118804敏感。STF-118804诱导白血病MV411细胞凋亡，而没有先前的细胞周期阻滞。

体内研究

STF-118804(25 毫克/千克，每天两次，皮下注射)提高高风险急性淋巴细胞白血病原位异种移植模型的生存率，并有效耗尽白血病初始化的细胞。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1667 mL

10.8335 mL

21.6671 mL

5 mM

0.4333 mL

2.1667 mL

4.3334 mL

10 mM

0.2167 mL

1.0834 mL

2.1667 mL

50 mM

0.0433 mL

0.2167 mL

0.4333 mL

酶试验:
NAMPT 和 NMNAT的酶活性使用体外试剂盒和每个制造商说明的两步法测定。化合物，NAMPT 和/或 NMNAT酶，以及它们的底物混合，在30°C下培育1小时。然后加入指示反应(Wst-1)的试剂，吸光度在30℃下以450nm通过Tecan Infinite M100多模板读数器每5分钟读取一次。

细胞实验

• Cell lines:人细胞系(SEM，MV411，Nalm6，697，Hal01，REH，SUP-B15 和 KP-Y-RL) 和初始白血病患者样本
• Concentrations:~10 μM
• Incubation Time:72小时
• Method:人细胞系或血统阴性脐带血细胞接种于96孔板(6×105细胞每毫升)。加入逐渐增加浓度的化合物，细胞在37°C/5% CO2下培育72小时。为检测活性，CellTiter-Blue试剂以1:10稀释物加入，平板在37°C/5% CO2下培育4小时，然后以激发波长555 nm，发射检测波长590 nm通过Flexstation II 384或Synergy H1阅读器读数。细胞活性也通过CellTiter-Fluor测定。细胞渗透性荧光肽底物GF-AFC试剂以1:2稀释物加入，平板在37°C/5% CO2下培育30分钟，然后以激发波长380 nm，发射检测波长505 nm在Synergy H1阅读器上读数。脐带血细胞排列在血细胞计数器上，细胞活性用台盼蓝排除染料评估。抑制浓度(IC50)使用Prism软件计算。主要患者样品置于96孔板中，并用逐渐增加浓度的STF-118804在37°C，5% CO2下培育48小时。将WST-1试剂加入培养基(1:10 稀释)，吸光度在450 nm使用Bio-Rad模型680酶标仪进行测定。所有测定重复三份进行。IC50使用CalcuSyn版2.0软件计算。

动物实验

• Animal Models:ALL 转染的 MV411 细胞的原位异种移植模型
• Formulation:20% [w/v] [2-羟丙基]-γ-环糊精/5% [v/v] DMSO
• Dosages:25毫克/千克，每天两次
• Administration:皮下注射