噻唑蓝;MTT

¥200.00

规格: 1g

CAS 号:298-93-1
英文名字:MTT
质量标准:≥98%,BR
库存详情未设置 SKU: MB4698-1 分类: , ,

噻唑蓝;MTT
分子式:C18H16BrN5S分子量:414.32

简介:MTT是一种生物染料。常用于基于MTT检测方法的细胞活力、细胞增殖或细胞毒性检测。因为MTT具有正电荷,它可以穿过细胞膜并被线粒体还原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有机溶剂。脱氢酶的检测,染色法。

别名:噻唑蓝(MTT);3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, MTT, Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide
物理性状及指标:
外观:……………………黄色或橙色固体
纯度:……………………≥98%
溶解性:…………………5mg/ml溶于水、盐溶液、培养基;溶于甲醇、DMSO,乙醇(20 mg/ml)
熔点: ………………………195℃。
干燥失重: …………………<1.0%
储存条件:2-8°C,避光防潮密闭干燥

运输条件:常温运输

用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。MTT产生淡黄色溶液,通过活细胞的线粒体脱氢酶转化为深蓝色甲瓒。用酸化的异丙醇溶解蓝色晶体,并在570nm处比色测量强度。
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2.细胞增殖及细胞活性测定。
使用方法推荐
普通MTT法实验步骤(仅供参考):
其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul.
2: 培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS配制,pH=7.4)20ul.继续孵育4 h,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10min,使结晶物充分融解。
4:比色:选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
MTT配制方法
通常MTT配成的终浓度为5mg/ml,须用PBS(磷酸缓冲液)或生理盐水做溶剂。(市面上一般MTT的包装为100mg,250mg或1g)
1.对于100mg这样的小包装,厂家都是将MTT放入小管中的,建议不要再用天平称量分装,而应该一次性将其全配制成溶液,如100mg用20mlPBS来溶解。
具体做法:
预先在50ml离心管(没有的话,可用培养瓶替代)加入20ml的PBS,从中先吸取500-1000ul的PBS
装入含MTT的小管中,吹打若十次后将其移入50ml离心管,然后再混匀。可以重复几次以使小管中的MTT不残留于管内。将MTT完全混匀后,用0.22um滤膜过滤以除去溶液里的细菌,分装避光(避光袋或是黑纸、锡箔纸包住)可长期保存于-20度。按细胞培养板每孔需加10ul计算,一般每96孔板约需1ml,所以分装时可考虑每管分装1ml。
2.对于大包装,可按上述方法称取一部分溶解,也有人将粉剂分装在EP管里,用的时候现配,直接往培养板中加。
3.配制MTT时用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60度水浴助溶。
【注意】
1、在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。
2、配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感。
3、MTT一般最好现用现配,过滤后4度避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃。
度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用。
4、MTT有致癌性,用的时候小心,一定要带手套。有条件可以采用我司推荐的MTT试剂盒,价格合算后已经相当亲民。

5 、我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
6、部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

Yellow or dark yellow powder

Solubility

5mg/ml water, clear

UV Max

λmax=243nm±1nm,380nm±1nm

Identification

HNMR

Purity (HPLC)

≥98%

规格

1g

相关文档

购物车