西仑吉肽

Cilengitide是有效，选择性的αvβ3和αvβ5受体整合素抑制剂，IC50分别为4和79 nM。

靶点

IC50: 4 and 79 nM (αvβ3and αvβ5)

体外实验

西仑吉肽（EMD 121974）是αvβ3和αvβ5整联蛋白受体拮抗剂。 在评估人黑素瘤M21或UCLA-P3人肺癌细胞系的细胞粘附研究中，西仑吉肽抑制整联蛋白介导的与玻连蛋白的结合，IC50为0.4和0.4μM。 西仑吉肽的体外治疗浓度大于1μM，显示浓度和时间依赖性细胞毒性作用。 然而，较低剂量的西仑吉肽单一疗法（0.1和0.5μM）不会引起U87MG和U251MG细胞的有效死亡。 在U87MG细胞中观察到显着的细胞毒性作用，其中加入1μM西仑吉肽与Belotecan单一疗法组合，浓度为6.25nM。 与较低浓度的西仑吉肽（1μM）相比，较高浓度的西仑吉肽（5和25μM）不会显着增加U87MG和U251MG中的细胞死亡。

体内实验

在携带M21-L黑素瘤肿瘤的裸鼠中，西仑吉特剂量i.p. 每周3次，10次，50次和250μg，肿瘤生长抑制，肿瘤体积减少（分别为55％，75％和89％）和肿瘤重量（23％，38％和61％） ，分别），与对照相比。 在研究的大鼠模型中，i.p。的全身药代动力学。 西仑吉肽不受ILP单用西仑吉肽或ILP与西仑吉肽加美法仑，TNF或两者的影响。 系统性西仑吉肽水平在腹膜内注射10分钟内达到约20μg/ mL（约35μM）。 施用并在第一个小时内持续升至约40μg/ mL（约70μM）。 此后血清中的西仑吉肽水平下降，消除半衰期为2.1小时。

c(RGDfK)

MB4703

Cyclo(RGDyK)

MB4057

RGD

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6988 mL

8.4939 mL

16.9877 mL

5 mM

0.3398 mL

1.6988 mL

3.3975 mL

10 mM

0.1699 mL

0.8494 mL

1.6988 mL

西伦吉肽制备成生理盐水无菌液。在盐水中稀释至1mM的浓度。
用细胞计数Kit-8 (CCK-8)检测两种药物Belotecan和Cilengitide的细胞毒性。U87MG和U251MG细胞在96孔板的播种密度的4×103细胞/允许粘附在一夜之间。之后,细胞治疗Cilengitide浓度为0,0.1,0.5,1、5和25µM Belotecan浓度为0,6.25,12.5,25、50和100海里。所有可能的浓度组合用于评估西伦吉肽和贝罗替康的联合治疗效果。3天后,10µL CCK-8的解决方案是添加到每个盘子,盘子是孵化孵化器3人力资源(37°C;5%的二氧化碳)。样品板的光密度(OD)是在450 nm的微板阅读器上测量的。通过计算每个样本中特定OD与对照OD的比值来评估肿瘤细胞的生存能力。每个实验一式四份。对这些值进行平均和归一化，以生成剂量响应曲线。

动物实验

西仑吉肽用盐水制备。
小鼠
将8周龄的雄性Balb / c-nu小鼠随机分为4组：对照组（n = 10），西仑吉肽组（n = 10），Belotecan组（n = 10）和组合组（n = 10）。西仑吉利以每天20mg / kg的剂量腹膜内给药，Belotecan以每10天10mg / kg的剂量给药。计算最佳剂量。对照组动物仅注射盐水。单剂量的药物包括3秒输注，体积为3mL / kg。在肿瘤细胞植入后第7天开始药物治疗16天。在植入肿瘤细胞后1个月处死一半动物用于肿瘤体积分析，并且观察其余动物另外2个月以分析存活。动物的死亡定义为体重减轻超过初始体重的25％或意外突然死亡。
大鼠
雄性近交系棕色挪威大鼠（250至300g）腹膜内注射。在分离肢体灌注前2小时和3小时后用50mg / kg西仑吉肽或盐水。大鼠用于研究灌注各种组合的美法仑，TNF和西仑吉肽的效果，有或没有额外的i.p.在ILP程序本身之前和之后施用西仑吉肽。 i.p.施用ILP之前和之后的施用旨在最佳地使可用的αVβ3和αVβ5整联蛋白饱和。盐水在i.p.中用作对照。和灌注设置。