鼠尾胶原蛋白I型

产品简介：

我公司生产的鼠尾胶原蛋白 I型(rat tail tendon collagen type I)是通过 Birkedal-Hansen1的方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀和磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。
美仑鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境，使细胞在三维环境中生长。
规格说明：
10mg, 5mg/mL, 溶解于 0.006mol/L HAc, 无菌。

特点

• 无尘车间内生产，保证洁净度
• 可用于包被细胞培养器皿(单分子层包被)
• 也可形成具有一定强度的三维胶用于细胞的三维空间培养
• 通过细胞培养测试(包括三维胶内的细胞培养)
• 电泳结果和进口S品牌的同类产品无显著区别。
• 产品为无菌的溶液，省去从干粉配制的麻烦。

使用方法

1. 细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm²
   以包被浓度为 2 ug/cm² 为例：
   用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。按表 (一)体积加到相应的培养器皿中：

   表一

   	表面积(cm2,每孔或每皿)	加入 0.012mg/ml 胶原的体积 ( ul )
   96孔细胞培养板	0.3	50
   24孔细胞培养板	1.9	300
   12孔细胞培养板	3.8	600
   6孔细胞培养板	9.5	1580
   35mm细胞培养皿	8	1330
   60mm细胞培养皿	21	3500
   100mm细胞培养皿	55	9170

   确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上过夜晾干。 也可以在室温放置1小时后，用PBS洗3-4次后直接使用。
   包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。

2. 三维胶原的制备
   美仑鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。美仑胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。
   需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水
   1. 不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul美仑鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H₂O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10xPBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
   2. 含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul美仑鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10xPBS或10x培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

      注意

      鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。

   运输条件：

   常温运输

   【注意】

   ●我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
   ●部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。