藻红蛋白(PE)

¥1,780.00

规格: 1mg

CAS 号: 11016-17-4

藻红蛋白(PE);R-Phycoerythrin;(R-PE)

Ex (nm) 565
Em (nm)575
溶解性:溶于水

简介:R-藻红蛋白(R-PE)是从红藻中分离出来的。它的主要光吸收峰在565nm,第二吸收峰在496和545nm处。它的第二类高峰中相对突起的吸收峰,在来自不同种类的R-PEs中有显著性的变化。R-PE由三个亚基组成,α,20,000 道尔顿_ (~20,000 daltons),β,20,000 道尔顿_ (~20,000 daltons) andγ,30,000 道尔顿_ (~30,000 daltons).研究发现完整的R-PE分子量大约在17-24万道尔顿,经过检测一个亚基由(α-β)6γ组成。
储存条件:2-8℃

常见使用方案举例(来自公开文献,仅供参考)
一:藻红蛋白标记小鼠抗人CD4单克隆抗体
1. 将保存在硫酸胺中的PE(5mg,约1.8ml)。充分摇匀后,取0.9ML,12000r/min 离心10min,弃上清。将沉淀重悬于0.5mlPBS中。在300MLPBS中室温透析30Min。期间换液俩次。
2. 调整PE浓度为1.4mg/ml,加入40ulSPDP (MB0059),浓度1.3mg/ml in 甲醇.室温孵育。2.5h
3. 取纯化CD4抗体200ul(25mg/ml)加入40ulSMCC(MB0442)(1.7mg/ml in DMSO);室温孵育1h
4. 将75ul DTT加到SPDP-PE中,室温孵育30Min
5. 用PD-10柱纯化SPDP-PE-DTT和SMCC-CD4单抗,并将其混合,4摄氏度搅拌过夜。
6. 在过夜的标记混合物种加入NEM(MB2727) 160ul (12.5mg/ml,PBS溶解)终止反应。4摄氏度继续搅拌30Min
7. 将标记抗体通过S-300柱在AKTA检测下分离纯化,PBS洗脱,收集第一峰。
8. 收集的标记抗体加入终浓度1%BSA,0.1% 防腐剂,1mmol/L碘乙酰胺,0.1mmol/L EDTA,4度保存
二:藻红蛋白标记抗体的方法:
1.巯基化藻红蛋白(PE)的制备;
(1)将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中;
(2)将以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合,而后装入透析袋置入50mmol/L pH6.8的PB中于4℃透析,过夜;
(3)再换用pH7.5 PB透析6h。每个PE分子中可结合8个巯基;
2.巯基PE-IgG的制备;
(1)将30μl浓度为1.1mg/ml的异双功能试剂SPDP的乙醇溶液,加入到700μl的4.2mg/ml IgG PB溶液(50 mmol/L pH7.5),在室温中反应2.5h;
(2)再将400μl浓度为1.7mg/ml的巯基化PE加到500μl反应混合液中,室温反应12h;
(3)加入50 mmol/L的碘乙酸钠100μl来封闭残余巯基,于4℃下用PB透析过夜;
(4)最后加入0.01%的Na3 N3 后分装,于4℃保存半年;
三:PE-标记蛋白A方法:
1.称取4.08mg PE溶于1ml浓度为0.1mmol/ml pH7.4的PBS中,溶解后,取出0.5ml,再加入浓度为2.65mg/ml的SPDP无水甲醇液10μl,SPDP/蛋白质物质的量比为10,22℃反应5min,过Sephadex G-50(1×17cm),用100mmol/L pH7.4的PBS平衡和洗脱;
2.将0.5ml浓度为2mg/ml的蛋白质和100mmol/L pH7.4的PBS液混合,把2.6μl上述SPDP甲醇液加入混合液中,使得SPDP:蛋白质=9:5,于22℃下放置40min后,再加如25μl pH7.4的二硫苏糖醇(DTT)缓冲液,于22℃下反应25min后,过Sephadex G-50,收集蛋白A峰;
3.将0.77mg/ml的PE和0.27mg/ml蛋白A等量混合,于22℃下反应6h后,将混合物于4℃保存备用;
4.将以上两种PE标记制品溶于0.01mol/L pH7.4 PB(含有0.1mol/L DETA、1mol/L 碘乙酰胺、1%BSA和0.1% NaN3 )中,于0—4℃保存;

相关产品推荐

MB0027

DTSP;3,3′-二硫代二丙酸 二(N-羟基丁二酰亚胺酯)

MB0034

蛋白磷酸酶抑制剂复合物 II 10x

MB0059

SPDP;N-琥珀酰亚胺-3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯

MB0149

Sulfo-SMCC

MB0364

GMPS

MB0365

BMPS

MB0387

AEDP

MB0391

Sulfo-EGS

MB0394

EGS

MB0442

SMCC

MB0842

DSS;双琥珀酰亚胺辛二酸酯

MB13002

MBS

MB13224

SATA

MB13232

SIA;碘乙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯

备注:所有报价均已含国内快递费及发票费用。库存情况可能有所变动,请与我们销售人员确认为准,价格情况请直接联系我们销售人员。

我司所售出产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究),每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的通用销售条款

规格

1mg

Documents

购物车