产品简介：
达克替尼Dacomitinib 是一种特异，不可逆的ERBB家族抑制剂，作用于EGFR，ERBB2和ERBB4。
分子式：C24H25ClFN5O2 分子量：469.94
别名：PF-00299804; PF-299804；2-Butenamide, N-[4-[(3-chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-methoxy-6-quinazolinyl]-4-(1-piperidinyl)-, (2E)-
物理性状及指标：
外观：………………白色至黄色固体
溶解性：……………DMSO：19 mg/mL (40.43 mM)；Water Insoluble；Ethanol Insoluble
含量：………………>99%
储存条件：
-20℃，避光防潮密闭干燥
运输条件：
2~8℃运输
| 产品描述 | Dacomitinib (PF299804, PF299)是一种有效的，不可逆的泛ErbB抑制剂，最有效作用于EGFR，无细胞试验中IC50为6 nM，高效作用于携带EGFR或ERBB2突变型(耐Gefitinib)和携带EGFR T790M突变型的NSCLCs。 |
|---|---|
| 靶点 |
EGFR
(Cell-free assay) 6.0 nM ErbB2
(Cell-free assay) 45.7 nM ErbB4
(Cell-free assay) 73.7 nM |
| 体外研究 | PF299804是ERBB家族激酶的特异性抑制剂。PF299804抑制EGFR信号传导，并诱导包含EGFR T790M的H3255 GR细胞系凋亡。PF299804能够有效作用于对gefitinib-敏感的和耐药的NSCLC细胞系。PF299804抑制表达T790M 突变体的H3255和 HCC827细胞的生长。T790M 突变体存在下，PF299804抑制EGFR磷酸化。通过在ATP位点的结合，以及ERBB家族成员的催化域中亲核性半胱氨酸残基的共价修饰，PF-299804能够不可逆抑制ERBB酪氨酸激酶活性。PF299804在HER2-扩增的胃癌细胞 (SNU216, N87) 中表现出显著的生长抑制作用，并且与其他EGFR酪氨酸激酶抑制剂，包括gefitinib，lapatinib，BIBW-2992，和CI-1033相比，PF299804具有低50%的抑制浓度值。在HER2-扩增的胃癌细胞，PF299804诱导细胞凋亡和G1期阻滞，并抑制HER家族和下游信号通路，包括STAT3，AKT，和细胞外信号调节激酶(ERK)中受体磷酸化。PF299804也会阻断SNU216细胞中EGFR/HER2，HER2/HER3，和HER3/HER4异质二聚体形成，以及HER3与p85α的结合。一项最近的研究使用47种人乳腺癌和永生的乳腺上皮细胞系，以评估PF299804的抑制作用，结果表明，相对于非扩增细胞系(RR = 3.39, p < 0.0001)，PF299804优先抑制HER-2-扩增的乳腺癌细胞系的生长。在大多数敏感细胞系中，PF299804降低HER2，EGFR，HER4，AKT和ERK的磷酸化作用。PF299804通过G0/G1期阻滞，并诱导细胞凋亡发挥其抗增殖作用。 |
| 体内研究 | PF299804口服给药有效抑制HCC827 Del/T790M异种移植物的生长。[1]PF-299804 (15mg/kg)低剂量口服给药引起显著的抗肿瘤活性，包括在各种人肿瘤异种移植模型中引起显著的肿瘤退化，如表达和/或过表达ERBB家族成员，或与耐gefitinib和erlotinib相关的含有双重突变(L858R/T790M)的ERBB1 (EGFR)异种移植模型。 |
用途及描述：
科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。 Dacomitinib (PF299804, PF299)是一种有效的，不可逆的泛ErbB抑制剂，最有效作用于EGFR，本品可用于相关领域的科研实验。
| 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1279 mL | 10.6397 mL | 21.2793 mL |
| 5 mM | 0.4256 mL | 2.1279 mL | 4.2559 mL |
| 10 mM | 0.2128 mL | 1.0640 mL | 2.1279 mL |
| 50 mM | – | – | – |
| 激酶实验 | 基于ELISA的 ERBB 激酶试验: ERBB1，ERBB 2，和ERBB4细胞质融合蛋白通过使用PCR将ERBB1序列(Met-668 到Ala-1211)，ERBB2 (Ile-675到Val-1256)，和ERBB4 序列(Gly-259)复制到杆状病毒载体制备。蛋白质在杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中以GST融合蛋白表达。蛋白质使用谷胱甘肽琼脂糖磁珠通过亲和色谱法纯化。ERBB酪氨酸激酶活性的抑制使用基于ELISA受体的酪氨酸激酶试验评估。激酶反应(每50 μL 反应混合物包含50 mM HEPES，pH 7.4，125 mM NaCl，10 mM MgCl2，100 μM原矾酸钠，2 mM 二硫苏糖醇，20 μM ATP，PF299804或载体对照，和1-5 nM GST-erbB)在0.25 mg/mL poly-Glu-Tyr包被的96孔板上进行。反应在室温下摇晃培育6分钟。除去反应混合物停止反应，然后用洗涤缓冲液(0.1% Tween 20的PBS溶液)清洗孔。耦合到辣根过氧化物酶(HRP)的0.2 μg/mL抗磷酸酪氨酸抗体(致癌基因Ab-4; 50 μL/well)，在包含3% BSA 和0.05% Tween 20的PBS中稀释，将其加入后，在室温下摇晃25分钟，以检测磷酸化的酪氨酸残基。将抗体移除，板在洗涤缓冲液中清洗。将HRP底物(SureBlue3,3¢,5,5¢-四甲基联苯胺或TMB)加入(50 μL/孔)，并在室温下摇晃培育10-20分钟。TMB反应通过加入50 μL停止溶液(0.09 N H2SO4)停止。信号通过测量450 nm下的吸光度定量。使用中值效应法测定PF299804的IC50值。 |
|---|---|
| 细胞实验 |
Cell lines:各种 NSCLC 细胞系 Concentrations:0-20 nM Incubation Time:72小时 Method:生长和生长抑制通过5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)法测定。该试验中，比色法测定活细胞数量是基于细胞对MTS的生物还原，以形成可溶于细胞培养基的甲臜产物，通过分光光度法检测。将细胞暴露处理72小时，每个实验使用的细胞数量根据经验测定。所有实验点在6到12个孔中建立，并且所有实验至少重复3次。这些数据使用GraphPad Prism 3.00版的Windows (GraphPad软件)直观显示。曲线使用非线性回归模型通过S形剂量反应曲线拟合。 (Only for Reference) |
| 动物实验 |
Animal Models:HCC827-GFP 或 HCC827-Del/T790M 肺癌细胞(在0.2 mL PBS中)皮下移植到裸鼠右下方四分之一侧腹。 Formulation:PF299804以10 mM在-20℃ 下溶解于DMSO Dosages:10 mg/kg Administration:口服强饲给药 |
- 【注意】
- ●我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
●部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
