DiD细胞膜荧光探针红色

¥500.00

规格: 10mg

库存详情未设置 SKU: MB6190-1 分类: , ,

品牌:meilunstar

产品简介:染料 DiD, DiI, DiO 和 DiR 是一类亲脂性荧光染料家族,用于标记细胞膜和疏水性组织。这是一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。它们具有很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。一旦应用于细胞中,这种染料会在细胞内质膜中逐步扩散,导致在其最佳浓度条件下,将整个细胞膜染色。它们不同的荧光颜色:DiI(橙色荧光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光),为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。
DiD(红色荧光)可以用来对活细胞进行成像和流式分析。DiD可以用633 nm He–Ne 激光器激发,有着比 DiI 更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。
基本信息

规格

10mg

产品形式

粉末

Ex (nm)

644

Em (nm)

663

分子量

959.91

溶剂

DMSO

产品应用标准实测:(由美仑细胞生物学项目组独立完成)
本品配成 5mM 溶液后为深蓝色液体溶液澄清度且颜色检测无可见异物;然后进行荧光染色检测:工作条件:荧光显微镜,C6 细胞,400×,工作浓度 5μM。
结果:经细胞膜荧光染色,在40倍物镜下可看到清晰荧光。此浓度下在荧光显微镜下看到的荧光亮度亦足以用于共聚焦检测。

储存条件:-20℃,避光防潮密闭干燥

运输条件:2~8℃运输

操作说明(仅供参考)

  1. 染色液制备

(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
【注】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。
【注】工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。

  1. 悬浮细胞染色

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
(2)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
(3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3.贴壁细胞的染色
(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
4.显微镜检测
DiD,DiO,DiI,DiR滤光器的选择参见表1。 DiD染色可见红色荧光。
5.流式细胞仪检测
DiO、DiI、DiD、DiR染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。

表1. 细胞膜荧光探针相关产品

货号

产品名称

分子量

Ex/Em

推荐滤光器

MB6190

DiD 细胞膜荧光探针红色

959.91

644/663 nm

XF47-Omega, 31023-Chroma

MB4240

DiI细胞膜荧光探针橙红色

933.87

550/567 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

MB4239

DiO细胞膜荧光探针绿色

881.7

484/501 nm

XF23-Omega, 31001-Chroma

MB12482

DiR细胞膜荧光探针深红色;DiR碘化物

1013.39

748/780 nm

XF112-Omega,41009-Chroma

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规格

10mg

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