Optimal-MEM减血清培养基,用于细胞转染

产品介绍：

Optimal-MEM减血清培养基（Optimal-MEM Reduced Serum Medium）是一种以Minimal Essential Medium(MEM)为基础经过改良的减血清培养基，能够在减少50%胎牛血清（FBS）添加量的情况下培养各种悬浮和贴壁哺乳动物细胞，包括Sp2/0、AE-1、CHO-K1、BHK-21、HEK 293T、Vero等。Optimal-MEM减血清培养基是为细胞转染而设计的，推荐与阳离子脂质体转染试剂（如美仑货号：MA3000/MA3001/MA3002/MA0672）配套使用。

本产品含有：L-谷氨酰胺、HEPES、酚红、丙酮酸钠、胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素。若需要不含有酚红的同类培养基，可选择美仑货号PWL042。

生产工艺：

本产品使用注射用水（Water for Injection）配制，生产程序严格按照GMP 管理规定，并在符合要求的净化车间中完成。

产品优势：

1. 与阳离子脂质体转染试剂配套使用，可有效提高转染效率。
2. 有效提高减血清培养情况下的细胞增殖速度，不影响细胞活性与形态。
3. 可减少血清添加量，有助于降低培养条件波动，延长同一批次血清的使用时间。
4. 注射用水配制，参考GMP管理规定生产，工艺稳定，批差异小。
5. 原料均选用自产或者经过严格检测和纯化的低内毒素高纯药用级别原料，热原水平低，减少外源内毒素干扰。
6. 严格的质量检测程序，远高于同行业要求指标，产品性能突出，指标媲美进口。
7. 进口材质无菌包装瓶，优秀的密闭性及内部涂层保护，极大地保证了产品的稳定性。

产品包装形式：

PWL041-1为100mL每瓶；PWL041-2为500mL每瓶。

保存条件：

2~8℃, protect from light.

运输条件：

湿冰运输（按季节）。

有效期：

自生产之日起12个月。

声明：

本产品供科学研究和生产使用，用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。

产品数据展示：

1、细胞增殖检测：

方法：在含有2% FBS的条件下，分别使用Meiluncell Optimal-MEM和进口G品牌 Opti-MEM培养合适细胞数接种的293T、BHK-21、CHO-K1、Sp2/0-Ag14、Vero、AE-1细胞，72h后进行细胞计数和存活率检测。
结果：如图1所示，使用Meiluncell Optimal-MEM培养的细胞增殖的细胞数更多，存活率与对照相近甚至一些细胞上高于对照。如图2所示，使用Meiluncell Optimal-MEM培养的细胞生长状态良好。

2、细胞贴壁率检测：

方法：在含有5% FBS的条件下，分别使用Meiluncell Optimal-MEM和进口G品牌 Opti-MEM培养100个细胞数接种的BHK-21和CHO-K1细胞，出现明显细胞集落后进行染色和计数。
结果：如图3所示，使用Meiluncell Optimal-MEM培养的细胞贴壁率更高。

3、细胞转染效率检测-贴壁细胞

方法：分别在293T、BHK-21、CHO-K1、Vero上转染质粒（表达EGFP），分别使用Meiluncell Optimal-MEM和进口G品牌Opti-MEM作为转染培养基，转染72h后荧光显微镜观察转染效率。

结果：如图4所示，使用Meiluncell Optimal-MEM作为转染培养基转染的细胞，绿色荧光数量明显多于普通MEM，与进口G品牌对照相近。

 图4. Optimal-MEM作为转染培养基时细胞转染效率的比较

4、细胞转染效率检测-悬浮细胞：

方法：分别在Expi 293F、CHO-K1 GS上转染EGFP质粒，分别使用Meiluncell Optimal-MEM和进口G品牌Opti-MEM作为转染培养基，转染72h后荧光显微镜观察转染效率。

结果：如图5所示，使用Meiluncell Optimal-MEM作为转染培养基转染的Expi 293F细胞，绿色荧光数量与进口G品牌对照相近；如图6所示，使用Meiluncell Optimal-MEM作为转染培养基转染的CHO-K1 GS细胞，荧光强度与进口G品牌对照相近。

图5. Optimal-MEM作为转染培养基时Expi 293F细胞转染效率的比较
图6. Optimal-MEM作为转染培养基时CHO-K1 GS细胞转染效率的比较

5、病毒包装效率检测：

方法：在293T上包装逆转录病毒（表达EGFP），分别使用Meiluncell Optimal-MEM和进口G品牌Opti-MEM作为转染培养基，转染72h后收获病毒液，再侵染293T，48h后用流式细胞仪检测绿色荧光蛋白的表达情况。
结果：如图7所示，使用Meiluncell Optimal-MEM作为转染培养基包装的逆转录病毒，在侵染细胞后，绿色荧光蛋白表达率与进口G品牌对照相近（±10%），说明两者包装得到的病毒滴度相近。

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