Sirtinol

Sirtinol是特异性SIRT1和SIRT2抑制剂，IC50分别为131 μM和38 μM。

靶点

Sirt1

Sirt2

IC50

131 μM

38 μM

体外研究

Sirtinol能够在体外有效地抑制酵母重组Sir2p的酶活性，IC50是68 μM。和TSA不一样，Sirtinol对人源的HDAC1却没有抑制效果，这暗示着Sirtinol可能是一种sirtuin家族特异性的抑制剂。和TSA不一样，Sirtinol处理人的初始成纤维细胞不引起组蛋白和微管蛋白整体乙酰化水平的变化，也不会导致HeLa肿瘤细胞系形态的变化。100 μM的Sirtinol处理MCF-7和H1299细胞24小时能够引起持续性的生长抑制直到第九天撤走Sirtinol。Sirtinol处理MCF-7和H1299细胞诱导SA-β-gal活性升高和PAI-1表达比Splitomicin更有效。用33 μM或者更高浓度Sirtinol处理MCF-7和H1299细胞抑制克隆形成的效果比Splitomicin更强。100 μM Sirtinol处理MCF-7和H1299细胞明显减少本底的和EGF或者IGF-I诱导产生的ERK，JNK/SAPK和p38 MAPK磷酸化水平。Sirtinol能够阻断本底的和EGF诱导的Ras活性。与其一致，Sirtinol处理的细胞中，本底的和EGF或者IGF-I诱导产生的Raf-1，MEK，SEK1/MKK4和MKK7磷酸化降低。Sirtinol通过抑制Sirt1活性增加UV和H2O2诱导的p53乙酰化从而加速皮肤角质细胞的凋亡。Sirt1的酶活被Sirtinol处理阻断后，明显抑制人源PCa细胞的生长和成活力，但对普通前列腺上皮细胞没什么影响。

体内研究

Sirtinol按1 mg/kg给药处理雄性SD大鼠能够减弱促炎性细胞因子的释放以及保护创伤后出血

特征

Sirtinol不抑制一类和二类的HDACs家族

AGK2

MB4152

SRT2104 (GSK2245840)

MB3761

EX527 (Selisistat)

MB4148

SRT2183

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5350 mL

12.6752 mL

25.3505 mL

5 mM

0.5070 mL

2.5350 mL

5.0701 mL

10 mM

0.2535 mL

1.2675 mL

2.5350 mL

50 mM

0.0507 mL

0.2535 mL

0.5070 mL

体外人源Sirt2酶活性抑制实验:
1.5μg的重组蛋白GST-Sirt2(氨基酸18-340)在50ul的反应体系里面30°C孵育2小时。反应缓冲液是50 mM Tris-HCl，pH 8.8， 4 mM MgCl2，0.2 mM 的二硫苏糖醇和不同浓度的Sirtinol，50 μM NAD，以及通过酸萃取法得到的氚标记的乙酰化HeLa 细胞组蛋白(1000 cpm)。HDAC活性通过溶于乙酸乙酯的氚标记乙酸的闪烁计数检测。

细胞实验：

• Cell lines:LNCaP，22Rv1， DU145和 PC3细胞系
• Concentrations:溶解于 DMSO，终浓度120 μM。
• Incubation Time:24 和48 小时
• Method:细胞生长密度60%，30 μM或者120 μM 的sirtinol 处理 24 或者48 小时。细胞用胰酶消化收集。离心去细胞沉淀，重悬于120 μL PBS中。台盼蓝(0.4% in PBS; 10 μL)与10μL细胞重悬液混匀，然后进行细胞计数。活细胞不能被染色，死细胞被染成蓝色。

动物实验：

• Animal Models:雄性SD大鼠创伤出血
• Formulation:溶于DMSO，磷酸盐缓冲液稀释
• Dosages:1 mg/kg
• Administration:静脉给药