Alectinib；CH5424802

CH5424802是有效的ALK抑制剂，IC50为1.9 nM,对L1196M突变型敏感，作用于ALK比PF-02341066, NVP-TAE684和PHA-E429选择性高。

靶点

ALK

ALKF1174L

ALKR1275Q

IC50

1.9 nM

1 nM

3.5 nM

体外研究

CH5424802作用于ALK为ATP竞争性的，解离常数(KD)为2.4 nM。CH5424802对ALK和L1196M具有强大的抑制效果，Ki分别为0.83和1.56 nM。CH5424802作用于表达EML4-ALK的NCI-H2228 NSCLC细胞，抑制ALK自磷酸化。CH5424802也抑制STAT3和AKT,而不是ERK1/2的磷酸化。CH5424802完全抑制STAT3在Tyr705位点的磷酸化。CH5424802优先有效作用于表达EML4-ALK的NCI-H2228细胞，而不作用于融合ALK的阴性NSCLC细胞系，包括单层培养的HCC827细胞(EGFR外显子19缺失), A549细胞(KRAS突变),或NCI-H522细胞(EGFR野生型, KRAS野生型,和ALK野生型)。CH5424802作用于NCI-H2228球体细胞，引起凋亡标记—caspase-3/7样激活。CH5424802抑制含NPM-ALK融合蛋白的两种淋巴瘤细胞, KARPAS-299和SR生长,为不影响不含ALK融合的HDLM-2淋巴瘤细胞生长。CH5424802作用于KARPAS-299具有高度靶向选择性和更强的抗增殖活性。CH5424802抑制KAPRAS-299，IC50为3 nM,抑制KDR，IC50为1.4 μM。CH5424802代谢稳定性很高。

体内研究

CH5424802口服处理，抑制肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性，ED50为0.46 mg/kg。CH5424802按20 mg/kg剂量处理，引起肿瘤快速衰退，衰退达168%,处理11天后(在第28天)每个鼠中的肿瘤体积<30 mm3,维持有效的抗肿瘤效果，且在4周的无药处理期间，不会出现肿瘤再生长。CH5424802处理小鼠的半衰期和口服生物有效性分别为8.6小时和70.8%。按6 mg/kg重复剂量处理，在2,7,和24小时后，平均血浆水平达到1.7,1.5,和0.3 nM。CH5424802处理抑制肿瘤生长。CH5424802按20 mg/kg剂量处理KARPAS-299和NB-1，在第20天，肿瘤生长抑制达119%和104%。CH5424802抑制STAT3磷酸化，这种作用存在剂量依赖性(2-20 mg/kg)。CH5424802处理的移植瘤中，观察到AKT磷酸化部分降低。

ASP3026

MB3330

PF-06463922

MB4539

RXDX-101

1 mg

5 mg

10 mg

• Cell lines:NSCLC, A549 和 HCC827 细胞
• Concentrations:0-1 μM
• Incubation Time:5天
• Method:NSCLC, A549 和HCC827细胞接种在96孔板中过夜，与不同浓度CH5424802按指定时间温育。球体细胞生长抑制实验中，细胞接种在球板上，温育过夜，然后在指定时间用化合物处理。通过发光细胞活性检测存活细胞。使用Caspase-Glo 3/7 检测试剂盒进行Caspase-3/7检测。

• Animal Models:携带NCI-H2228细胞的 SCID 或裸鼠
• Formulation:0.02 N HCl, 10% DMSO, 10% Cremophor EL, 15% PEG400, 和 15% HPCD (2 – 羟丙基-β-环糊精)
• Dosages:20 mg/kg
• Administration:口服处理