Purmorphamin

¥890.00

规格: 5mg

CAS 号:483367-10-8
英文名字:Purmorphamine
质量标准:>98%,BR

库存详情未设置 SKU: MB3700-1 分类: , 标签:

Purmorphamine
分子式:C31H32N6O2 分子量:520.62

简介: Purmorphamine是一种平滑受体激动剂,EC50为1 μM。
别名:2-(1-Naphthoxy)-6-(4-morpholinoanilino)-9-cyclohexylpurine; 9-Cyclohexyl-N-[4-(4-morpholinyl)phenyl]-2-(1-naphthalenyloxy)-
物理性状及指标:
外观:………………白色至类白色粉末
溶解性:……………DMSO:4 mg/mL warmed (7.68 mM);Water Insoluble;Ethanol Insoluble
含量:………………>98%

储存条件: -20℃,避光防潮密闭干燥

运输条件:2~8℃运输
生物活性

产品描述 Purmorphamine直接结合并激活Smoothened,阻断BODIPY-cyclopamine与Smo结合,在HEK293T细胞中IC50约为1.5 μM,也诱导成骨细胞分化,EC50为1μM
靶点
Smoothened
(HEK293T cells)
~1.5 μM
体外研究 Purmorphamine与Cyclopamine(一种Smo拮抗剂)竞争,直接结合和激活Smoothened,而激活Hedgehog通路,IC50为1.5 μM。Purmorphamine作用于全能C3H10T1/2 细胞,是有效的骨生成诱导剂。Purmorphamine作用于C3H10T1/2细胞的EC50(根据ALP表达) 为1 μM。Purmorphamine (1 μM) 和BMP-4 (100 ng/mL)联用,作用于3T3-L1细胞,使ALP活性增强90多倍。与BMP-4相比, Purmorphamine作用于多能间充质祖细胞,诱导骨生成,通过激活Hedgehog信号。
体内研究 Purmorphamine作用于基于大鼠结构的人间充质干细胞,上调ALP表达。

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用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。Purmorphamine是一种平滑受体激动剂,本品可用于相关领域的科研实验。
储液配置

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM 1.9208 mL 9.6039 mL 19.2079 mL
5 mM 0.3842 mL 1.9208 mL 3.8416 mL
10 mM
50 mM

经典实验操作(仅供参考)

激酶实验: 结合实验:
使用BODIPY-Cyclopamine和过表达Smo的细胞进行Smo结合实验,使用CMV启动子, 含SV40起点的表达载体,获得Smo-Myc3,缺失突变体Smo CRD (68到182位氨基酸缺失), 和Smo CT (556到793位氨基酸缺失)。HEK 293T细胞在12孔板中的聚-D-赖氨酸处理的玻璃盖玻片上生长,直到70%汇合,然后使用FuGene 6,通过适当的表达载体(每孔0.5g)进行转染。转染两天后,HEK 293T细胞与含0.5%小牛血清,5 nM BODIPY-Cyclopamine,和不同浓度的Purmorphamine (0, 1.5, 或5 M) (每孔1 mL)的 DMEM培养基在37°C下温育1小时。然后使用1×PBS缓冲液(每孔1 mL)洗涤过表达Smo的细胞,置于含DAPI的培养基,使用Leica DM4500B荧光显微镜观察。使用固定细胞进行结合检测,使用溶于1×PBS缓冲液(每孔1 mL)的3%多聚甲醛在室温下固定过表达Smo的HEK293T细胞10分钟,然后使用含10mM甘氨酸和0.2%叠氮化钠的1×PBS缓冲液(每孔1 mL)处理5分钟,使用1×PBS缓冲液(每孔1 mL)洗涤,然后再使用含Purmorphamine的培养基在室温下处理4小时。
细胞实验:
  • Cell lines:C3H10T1/2 细胞
  • Concentrations:0.5-10 μM
  • Incubation Time:4 天
  • Method:C3H10T1/2细胞在T175烧瓶中扩增,第13通道的细胞通过胰蛋白酶/EDTA分离,然后在生长培养基中稀释。使用Multi-dropTM液体传输系统,将产生的细胞悬浮液按每孔2500个细胞接种到黑色透明底384孔板中,孔中为100 µL生长培养基。温育过夜后,细胞附着到孔的底部。使用Mini TrakTM多位分配系统,将溶于DMSO (500 nL)的每组Purmorphamine储存液输送到对应孔中,确保Purmorphamine终浓度为5μM。然后细胞置于37°C下含5% CO2的空气中温育。4天后,除去培养基,10 μL被动裂解缓冲液加入到每孔中。5分钟后,10 μL碱性磷酸酶底物溶液添加到每孔中。在室温下温育15分钟后,在Acquest高通量酶标仪上对实验板进行读数。

【注意】
●我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
●部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

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规格

5mg

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