PD173955

PD173955 是一种强效的Bcr-Abl抑制剂，IC50为1-2 nM,同时也可抑制Src活性，IC50为22 nM。

靶点

体外研究

PD173955有效抑制Bcr-Abl依赖性细胞生长，在Bcr-Abl 阳性细胞系中IC50为2-35 nM，比Bcr-Abl阴性细胞系敏感100到200倍。PD173955也会抑制试剂盒配体依赖性M07e细胞增殖，IC50为40 nM，通过抑制试剂盒配体依赖性c-kit自身磷酸化。此外，PD173955，作为Src抑制剂，在各类型细胞早期有丝分裂期间有效抑制有丝分裂进程，并诱导不同程度的细胞凋亡。

Bafetinib (INNO-406)

MB3956

DCC-2036 (Rebastinib)

MB3957

GNF-2

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2556 mL

11.2778 mL

22.5555 mL

5 mM

0.4511 mL

2.2556 mL

4.5111 mL

10 mM

0.2256 mL

1.1278 mL

2.2556 mL

50 mM

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体外Bcr-Abl激酶试验:
在维持对数期培养条件下，Bcr-Abl联合SHIP2从K562细胞裂解物中免疫沉淀。复合物在蛋白质A-琼脂糖上被收集，并且在裂解缓冲液中清洗3次，然后在abl激酶缓冲液[50 mM Tris (pH 8.0)，10 mM MgCl2，1 mM DTT，2 mM 对硝基苯酚磷酸盐，和2 μM ATP；新英格兰生物实验室缓冲液和方案]中清洗2次。在指示浓度的药物存在或不存在下，激酶试验用10 μM [γ-32P]ATP/样品在30°C下进行15到60分钟。加入SDS-PAGE样品缓冲液并在100°C下加热10分钟停止反应。蛋白质在7.5% SDS聚丙烯酰胺凝胶上分离，凝胶在真空下干燥，磷酸化过程通过X-ray胶片的放射自显影可视化。

细胞实验

• Cell lines:Bcr-Abl阳性细胞系(R10(+)，R10(−)，K562，和 RWLeu4)；Bcr-Abl阴性细胞系(HL-60，SK-N-ER，SK-N-MC，U138MG，和 HS-16)
• Concentrations:10 μM
• Incubation Time:48小时
• Method:细胞生长通过两种方法确定。对于[3H] 胸苷测定，细胞(104细胞/孔)接种于96孔圆底平板，在DMSO(对照)，或悬浮于DMSO中的不同浓度特定化合物下于37°C培养48小时。[3H] 胸苷以1 μCi/孔的浓度加入，细胞再培育18小时。用Unifilter系统采集细胞，将闪烁液(25微升/孔)加入每孔，[3H] 胸苷的整合通过Packard闪烁计数器测定。所有测定的数据点重复得到3份，确定无细胞孔中的背景整合，并从所有数据点中减去。对于细胞活性，采集的对照组和药物处理过的细胞使用台盼蓝染色排除法在血细胞计数器上计数。